來(lái)源與構(gòu)建：該細(xì)胞系以 CHO-K1 細(xì)胞為親本，通過(guò)慢病毒載體介導(dǎo)將人 HRH1 基因?qū)爰?xì)胞基因組，經(jīng)嘌呤霉素抗性篩選及單克隆純化獲得穩(wěn)定株，“HRH1" 明確標(biāo)識(shí)其表達(dá)的靶受體，與普通 CHO 細(xì)胞形成功能區(qū)分。構(gòu)建過(guò)程中采用 CMV 啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)，結(jié)合信號(hào)肽優(yōu)化序列，使 90% 以上的 HRH1 定位于細(xì)胞膜，確保受體與配體的高效結(jié)合。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞呈多邊形，排列規(guī)則，邊界清晰，核質(zhì)比正常，形態(tài)與親本 CHO-K1 細(xì)胞一致。在 37℃、5% CO?條件下，增殖穩(wěn)定，傳代周期約 24-30 小時(shí)，可適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 F12K 培養(yǎng)基，傳代 60 次以上仍能維持 HRH1 高表達(dá)（表達(dá)量為親本細(xì)胞的 25-35 倍），受體活性無(wú)明顯衰減，顯著優(yōu)于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。

表達(dá)特征：HRH1 為 G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR），膜表達(dá)量達(dá)（1.5-2.0）×10?分子 / 細(xì)胞（流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)），對(duì)組胺的親和力高（解離常數(shù) Kd≈2×10?? M）。激活后可快速啟動(dòng)下游信號(hào)通路：通過(guò) Gq 蛋白介導(dǎo)磷脂酶 C（PLC）激活，使胞內(nèi) IP3 水平升高，觸發(fā)鈣離子釋放（組胺刺激后胞內(nèi)鈣濃度峰值提升 3-5 倍），同時(shí)激活 MAPK/ERK 通路，功能活性接近人源組織中的天然受體。

優(yōu)勢(shì)：HRH1 表達(dá)穩(wěn)定，長(zhǎng)期傳代后功能活性波動(dòng)＜10%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性優(yōu)于原代肥大細(xì)胞；遺傳背景清晰，與 CHO-K1 細(xì)胞同源性高，便于通過(guò)親本對(duì)照排除非特異性效應(yīng)；受體信號(hào)通路完整，可模擬體內(nèi)組胺反應(yīng)的級(jí)聯(lián)過(guò)程，功能更接近生理狀態(tài)；培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單，兼容貼壁與懸浮培養(yǎng)，適合高通量藥物篩選。

局限性：作為卵巢來(lái)源細(xì)胞，缺乏肥大細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等 HRH1 主要表達(dá)細(xì)胞的微環(huán)境，部分組織特異性調(diào)控機(jī)制（如細(xì)胞因子對(duì)受體的調(diào)節(jié)）無(wú)法wan全模擬；倉(cāng)鼠與人類的 G 蛋白亞型存在細(xì)微差異，可能導(dǎo)致部分信號(hào)傳導(dǎo)效率與人體存在偏差，需結(jié)合人源細(xì)胞驗(yàn)證；高表達(dá)受體可能導(dǎo)致配體敏感性過(guò)高，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格控制組胺濃度。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 F12K 培養(yǎng)基，添加 2μg/mL 嘌呤霉素維持抗性篩選，37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)良好。傳代時(shí)控制融合度在 70%-80%，采用溫和方法分離細(xì)胞，避免機(jī)械損傷影響受體膜定位。進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)前，建議用無(wú)血清培養(yǎng)基饑餓處理 16-24 小時(shí)，減少血清成分對(duì) GPCR 信號(hào)的干擾。

質(zhì)控與安全：定期通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) HRH1 膜表達(dá)量，Western blot 驗(yàn)證蛋白完整性；STR 鑒定確保細(xì)胞純度，支原體檢測(cè)需為陰性。凍存使用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，液氮保存可維持活性 5 年以上，復(fù)蘇后傳代 2 次待狀態(tài)穩(wěn)定后再用于實(shí)驗(yàn)，保證結(jié)果可靠性。