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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-0541Vero非洲綠猴腎細胞系

Vero非洲綠猴腎細胞系
產品型號:BY-0541
簡要描述:

Vero非洲綠猴腎細胞系,上皮樣,貼壁生長,無內源性病毒,對多種病毒敏感,適用于疫苗生產、病毒分離及藥物安全性評價,是生物制藥重要細胞系。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

Vero非洲綠猴腎細胞系
Vero非洲綠猴腎細胞系,Vero 細胞系是從非洲綠猴腎臟皮質細胞分離建立的連續傳代細胞系,因具有無內源性病毒污染、對多種病毒高度敏感且能大規模培養等特性,成為生物制藥領域的重要細胞系。其與靈長類腎臟細胞的生物學特征高度相似,且經長期驗證保持穩定的病毒支持能力,為疫苗生產、病毒學研究及藥物安全性評價提供了兼具安全性與可靠性的實驗平臺,尤其在滅活疫苗與減毒活疫苗生產中占據重要地位。
一、細胞起源與生物學特性
  1. 來源與建立背景

Vero 細胞系源自 1962 年日本千葉大學從正常成年非洲綠猴腎臟分離的原代細胞,經連續傳代獲得永生化表型(“Vero" 源自日語 “verde",意為 “綠色",指代非洲綠猴)。該細胞系因未經過病毒轉化,保留了正常腎上皮細胞的功能特征,1987 年被 WHO 批準用于人用疫苗生產,解決了原代細胞傳代受限、批次差異大的問題,成為較早實現疫苗產業化的靈長類細胞系。
  1. 形態與生長特征

細胞呈典型上皮樣形態,貼壁生長時呈多邊形,排列緊密且有極性,胞質均勻,細胞核呈橢圓形(核質比約 1:3),核仁不明顯。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基,倍增時間約 48-52 小時,傳代比例 1:2 至 1:4,每周換液 2-3 次以維持細胞融合度在 70%-80%。細胞凍存復蘇存活率超 85%,連續傳代 300 次后仍保持穩定核型(60 條染色體),無致瘤性(裸鼠接種無腫瘤形成),符合生物制品用細胞系安全標準。
  1. 功能特性

  • 病毒敏感性譜:對 100 余種病毒具有高度敏感性,尤其對黃病毒科(登革熱、乙腦病毒)、副黏病毒科(麻疹、腮腺炎病毒)的感染效率達 95% 以上,48-72 小時出現典型細胞病變;對脊髓灰質炎病毒、狂犬病病毒的支持能力被 WHO 列為國際標準,病毒滴度可達 10?-10? TCID??/mL,顯著高于原代細胞。

  • 無內源性病毒:經全面篩查未發現逆轉錄病毒等內源性病毒序列,且不表達 SV40 大 T 抗原等轉化蛋白,生物安全性遠高于病毒轉化細胞系,為疫苗生產提供安全保障。

  • 代謝與分泌功能:具有活躍的葡萄糖轉運與氨基酸代謝能力,在無血清培養基中可維持 5 代以上生長,分泌的細胞外基質成分(如層粘連蛋白)可促進自身貼壁與病毒吸附,提升病毒感染效率。

二、核心應用領域
  1. 人用疫苗規模化生產

  • 滅活疫苗生產:作為脊髓灰質炎滅活疫苗(IPV)、狂犬病疫苗的主力生產細胞系,Vero 細胞在生物反應器中可實現高密度培養(細胞密度達 5×10?個 /mL),IPV 單批次病毒產量達 101? TCID??,較原代猴腎細胞提升 20 倍,且疫苗純度更高(宿主蛋白殘留<50ng / 劑),全球多數 IPV 由 Vero 細胞生產。

  • 減毒活疫苗研發:在乙腦減毒活疫苗生產中,Vero 細胞的病毒滴度達 10? PFU/mL,疫苗接種后中和抗體陽轉率超 95%,且無傳統雞胚培養的過敏原問題,已被 100 余個國家納入免疫規劃。

  1. 病毒學研究與診斷試劑開發

  • 病毒分離與鑒定:作為臨床病毒診斷的重要細胞系,Vero 細胞可從咽shi子、腦脊液等樣本中分離流感病毒、腺病毒等,分離率較 MDCK 細胞高 15%-20%,且能保持病毒的原始生物學特性,為病毒變異監測提供關鍵樣本。

  • 診斷試劑盒生產:利用其高效表達病毒抗原的特性,制備病毒抗體檢測試劑,如登革熱病毒 NS1 抗原檢測試劑盒,靈敏度達 90%,特異性 95%,較昆蟲細胞表達系統成本降低 40%。

  1. 藥物安全性評價

  • 細胞病變效應(CPE)檢測:用于評估藥物的體外毒性,通過檢測藥物對 Vero 細胞的 IC??值預測體內毒性,與動物實驗結果一致性達 80%,如某抗病du藥物的 Vero 細胞 IC??與小鼠 LD??呈顯著正相關(R2=0.85)。

  • 疫苗安全性驗證:作為疫苗批簽發的標準細胞系,檢測疫苗中的殘余病毒與毒性物質,確保每批次疫苗的 CPE 陰性率達 100%,為疫苗上市前的最后一道安全防線。

三、培養與實驗操作要點
  1. 基礎培養方案

  • 培養基:MEM 培養基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 維持在 7.2-7.4;大規模生產時可采用無血清培養基(含重組胰島素、轉鐵蛋白),減少血清帶來的批次差異。

  • 傳代流程:當細胞融合度達 80% 時,消化處理后按 1:3 比例接種,離心速度 800rpm(避免細胞損傷),24 小時貼壁率超 90%,避免過度融合(>90% 會降低病毒敏感性)。

  • 凍存保護:采用含 10% DMSO 的wan全培養基,細胞密度 1×10?個 /mL,程序降溫速率 - 1℃/ 分鐘,液氮保存后復蘇存活率可達 85%,建議每 10 代凍存一次以保持細胞活力。

  1. 病毒培養與檢測操作

  • 病毒接種優化:細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板,培養 24 小時后換無血清培養基,加入病毒液(MOI=0.1),37℃吸附 2 小時后換維持液(含 2% 血清),每日觀察 CPE,48 小時后通過 TCID??法測定滴度,結果變異系數<8%。

  • 大規模培養技巧:在微載體培養系統中,攪拌速度控制在 40-60rpm,溶氧維持在 50%-60%,pH 7.3,可顯著提升細胞密度與病毒產量,如狂犬病病毒在該系統中的產量較靜態培養提升 5 倍。

四、優勢與局限性
  • 優勢

  1. 生物安全性卓yue:無內源性病毒與致瘤性,是被 WHO 批準用于全年齡段疫苗生產的靈長類細胞系,安全性經過長期臨床驗證。

  1. 病毒敏感性廣譜:對多種人類病毒的支持能力突出,尤其適合未知病毒的分離與鑒定,為新發傳染病防控提供關鍵工具。

  1. 產業化成熟:適應大規模懸浮培養,已建立標準化生產工藝,全球年產能可滿足 10 億人份疫苗需求,成本低于人類二倍體細胞系。

  • 局限性

  1. 增殖速率較慢:倍增時間較長,大規模培養周期長,增加生產成本。

  1. 轉染效率低:轉染效率僅 10%-20%,不適合基因功能研究,需依賴病毒載體進行外源基因導入。

  1. 物種特異性差異:與人類細胞的糖基化模式存在一定差異,可能影響部分病毒樣顆粒的免疫原性。

五、研究意義與展望

Vero 細胞系的建立徹di改變了疫苗生產格局,其在脊髓灰質炎、狂犬病等疫苗中的應用,直接推動了全球傳染病防控的進程,僅 IPV 就使全球脊灰病例減少 99%。未來,通過基因編輯技術優化其病毒受體表達(如增加 ACE2 受體),可提升對冠狀病毒的敏感性;結合連續灌流培養技術,有望將病毒生產周期縮短 30%,為新發傳染病疫苗的快速研發提供更強大的平臺。作為生物制藥領域的重要細胞系,Vero 細胞系仍將在疫苗研發與公共衛生安全中發揮核心作用。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

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