国产一区二区三区色区,国产欧美亚洲一区二区三区在线,亚洲精品国产极品美女mm131,欧美精品与人动性物交免费看

產品系統PRODUCT CENTER

在發展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學的管理促進企業迅速發展
產品系統

首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1390B95-8 EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞系

B95-8 EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞系
產品型號:BY-1390
簡要描述:

B95-8 EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞系,淋巴母細胞樣,懸浮生長,分泌 EBV,表達 CD21 等受體,適用于 EBV 研究、病毒分離及干擾素生產。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

B95-8 EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞系
B95-8 EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞系,B95-8 細胞系是絨猴(狨猴)B 淋巴細胞經 EB 病毒(Epstein-Barr virus, EBV)轉化形成的永生化淋巴母細胞模型,因能持續分泌傳染性 EBV 顆粒、高表達 EBV 相關抗原及 CD21 等受體,成為 EBV 生物學研究、病毒分離及干擾素生產的核心工具。其保留 B 淋巴細胞的免疫特性與病毒感染相容性,為皰疹病毒與宿主相互作用研究提供了du特的實驗平臺。
一、細胞起源與生物學特性
  1. 來源與轉化機制

B95-8 源自 1970 年代分離的絨猴外周血 B 淋巴細胞,通過 EBV 體外感染轉化獲得(“B95" 代表原始分離編號,“8" 為克隆株標記)。該細胞系穩定攜帶 EBV 基因組,其轉化機制與 EBV 編碼的潛伏膜蛋白 1(LMP1)和 EB 核抗原 2(EBNA2)相關 ——LMP1 模擬腫瘤壞死因子受體信號通路,激活 NF-κB 等促增殖通路;EBNA2 則調控宿主細胞周期基因表達,使細胞獲得無限增殖能力。
  1. 形態與生長特征

細胞呈典型淋巴母細胞樣形態,圓形或橢圓形,胞質少而核質比高,以懸浮生長為主,可形成直徑 50-100μm 的細胞團。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養基,倍增時間約 48-56 小時,傳代比例 1:2 至 1:3,每周需換液 2 次以維持細胞密度在 5×10?-2×10? cells/mL。細胞凍存復蘇存活率超 85%,液氮保存 5 年后仍可穩定分泌 EBV,病毒滴度無顯著下降。
  1. 遺傳與功能特性

  • 染色體核型:保留絨猴二倍體核型特征(2n=46),長期傳代后異倍體比例<15%,核型穩定性優于人類 EBV 轉化的 B 細胞系。

  • EBV 相關標志物:持續表達 EBV 潛伏抗原(EBNA1、LMP1)與早期抗原(EA),晚期抗原(VCA)表達率約 30%-40%(免疫熒光檢測),可自發釋放傳染性 EBV 顆粒(滴度 10?-10? PFU/mL)。

  • 受體表達:高表達 EBV 主要受體 CD21(陽性率>90%)及 B 細胞表面標志物 CD19、CD20,支持 EBV 再次感染與復制。

二、核心應用領域
  1. EBV 生物學研究

  • 病毒復制周期解析:B95-8 可通過丁酸鈉或巴佛洛霉素 A1 誘導,使 EBV 從潛伏狀態進入裂解期,實現病毒全生命周期的體外模擬。例如,通過誘導后不同時間點的轉錄組分析,已鑒定出 30 余個新的 EBV 裂解期調控基因,為理解病毒潛伏 - 裂解轉換機制提供關鍵數據。

  • 病毒顆粒制備:作為實驗室 EBV 標準來源,其分泌的病毒顆粒可用于感染人 B 淋巴細胞,建立 EBV 轉化的永生化細胞模型(轉化效率約 10??-10?3),用于研究 EBV 與淋巴瘤、鼻咽癌發生的關聯。

  1. 干擾素生產與抗病毒研究

  • 天然干擾素制備:B95-8 在 EBV 刺激下可高表達 Ⅰ 型干擾素(IFN-α/β),經誘導后干擾素活性單位可達 10? IU/mL,是早期人用干擾素制劑的重要生產來源。其分泌的干擾素對 EBV、皰疹病毒等具有廣譜抑制作用,為天然抗病du藥物研發提供參考。

  • 抗病du藥物篩選:基于其 EBV 復制特性,可構建藥物篩選模型。例如,通過檢測抗病du藥物對 EBV DNA 聚合酶的抑制效果,測定藥物 EC??,與臨床療效相關性達 0.86,為抗 EBV 藥物評估提供可靠平臺。

  1. 疫苗研發與診斷試劑生產

  • EBV 疫苗候選抗原制備:B95-8 可高效表達 EBV 糖蛋白 gp350(病毒主要包膜蛋白),重組 gp350 純度可達 95% 以上,已用于 EBV 疫苗的臨床前研究,動物實驗顯示其可誘導中和抗體效價達 1:10000 以上。

  • 診斷抗原制備:其表達的 EBV VCA、EA 可作為診斷抗原,用于傳染性單核細胞增多癥及 EBV 相關腫瘤的血清學檢測(如 ELISA 試劑盒),敏感性達 90%,特異性>95%。

三、培養與實驗操作要點
  1. 基礎培養方案

  • 培養基:RPMI 1640 培養基添加 10% 胎牛血清,pH 維持在 7.2-7.4,可加入營養補充劑增強細胞活力。

  • 傳代流程:取對數生長期細胞懸液,1000rpm 離心 5 分鐘,棄上清后用新鮮培養基重懸,按 1:3 比例接種至新培養瓶,避免細胞密度過高導致凋亡(存活率<70%)。

  • 凍存保護:取密度 1×10? cells/mL 的細胞懸液,加入等量含 20% DMSO 的培養基(終濃度 10% DMSO),分裝后經程序降溫盒 - 80℃過夜,轉移至液氮長期保存。

  1. EBV 誘導與收集

  • 裂解期誘導:向對數期細胞中加入 3mM 丁酸鈉,37℃培養 48 小時后更換含 0.1μg/mL 巴佛洛霉素 A1 的培養基,繼續培養 24 小時,EBV 分泌量可提升 5-10 倍。

  • 病毒收集:收集誘導后 72 小時的細胞上清,3000rpm 離心 30 分鐘去除細胞碎片,0.45μm 濾膜過濾后,-80℃分裝保存,使用前需通過噬斑實驗測定滴度。

四、優勢與局限性
  • 優勢

  1. EBV 分泌穩定:是能持續釋放高滴度傳染性 EBV 的細胞系之一,為 EBV 研究提供標準化病毒來源。

  1. 功能多樣性:既可用于病毒學基礎研究,又能生產干擾素與診斷抗原,應用場景廣泛。

  1. 培養簡便:懸浮生長無需貼壁支持,適合大規模懸浮培養,便于工業化生產。

  • 局限性

  1. 物種差異:作為絨猴細胞,其 EBV 復制調控機制與人類細胞存在差異,部分研究結果需在人源細胞中驗證。

  1. 病毒安全性:分泌的 EBV 具有傳染性,操作需在生物安全二級實驗室進行,避免實驗室感染風險。

  1. 誘導效率波動:EBV 裂解期誘導效率受細胞代次影響(傳代>50 次時下降約 40%),需定期篩選高分泌亞克隆。

五、研究意義與展望
B95-8 細胞系的建立為 EBV 研究提供了里程碑式工具,其持續分泌 EBV 的特性推動了 EBV 轉化機制、潛伏感染等基礎研究的突破,同時支撐了干擾素藥物與 EBV 診斷試劑的早期開發。當前,該細胞系仍廣泛應用于 EBV 疫苗研發、抗病du藥物篩選等領域,并通過基因編輯技術(如 CRISPR-Cas9 敲除 LMP1)構建突變體模型,深入解析 EBV 致癌機制。未來,結合類器官技術與 B95-8 來源的 EBV,有望建立更接近體內環境的 EBV 感染模型,為 EBV 相關疾病的防治提供新的研究思路與技術支撐。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

產品咨詢

留言框

  • 產品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7

相關產品

掃一掃
添加微信

掃一掃
手機瀏覽

Copyright©2025  上海乾思生物科技有限公司  版權所有    備案號:滬ICP備2023041625號-7    sitemap.xml    技術支持:化工儀器網    管理登陸

TEL:021-34556080