肺特異性標(biāo)志物與修復(fù)因子：高表達(dá)肺部特異性標(biāo)志物，如表面活性蛋白 A（SP-A，陽性率 97%）、 Clara 細(xì)胞分泌蛋白（CCSP，陽性率 96%），其 SP-A 在損傷后表達(dá)量可提升 4 倍（SEP-K1 無此特性）；分泌角質(zhì)細(xì)胞生長因子（KGF）和轉(zhuǎn)化生長因子 -β（TGF-β），其中 KGF 含量達(dá) 40pg/10?細(xì)胞 / 天，能促進(jìn)肺上皮細(xì)胞遷移（遷移速率是靜止期細(xì)胞的 2.3 倍），模擬肺部損傷后的修復(fù)啟動過程，與小耳豬肺損傷組織的功能一致性達(dá) 90%。

屏障功能與代謝特性：具有完整的肺上皮屏障功能，跨上皮電阻（TEER）值達(dá) 450Ω?cm2（顯著高于 SEP-K1），緊密連接蛋白 occludin 和 claudin-18 表達(dá)豐富；能分泌表面活性物質(zhì)（含量達(dá) 12μg/10?細(xì)胞 / 天），維持肺泡表面張力，其氧氣交換相關(guān)酶活性與小耳豬肺組織高度吻合，可模擬肺部氣體交換的基礎(chǔ)代謝過程。

病毒敏感性譜：對呼吸道病毒（如 PRRSV）的感染效率達(dá) 98%，感染后 48 小時出現(xiàn)典型細(xì)胞病變（細(xì)胞融合、空泡化），病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL（是 SEP-K1 細(xì)胞的 9 倍）；因高表達(dá) PRRSV 受體 CD163，對肺部靶向病毒的吸附效率顯著高于腎細(xì)胞系，尤其適合肺相關(guān)病毒病研究。

急性肺損傷模型：通過該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)脂多糖（LPS）可激活 TLR4/MyD88 通路，使炎癥因子 TNF-α 表達(dá)量提升 5 倍，SP-A 表達(dá)下降 60%，與小耳豬急性肺損傷的病理特征一致性達(dá) 93%（SEP-K1 模型無法模擬），揭示 “炎癥 - 屏障破壞" 的肺部病變軸。

修復(fù)信號調(diào)控機(jī)制：在 KGF 干預(yù)實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞遷移速率提升 70%，凋亡率下降 55%，其下游 ERK 通路磷酸化水平增加 3 倍，證實(shí) KGF 在肺損傷修復(fù)中的關(guān)鍵作用，為清肺藥物研發(fā)提供靶點(diǎn)。

PRRSV 致肺損傷機(jī)制：利用其肺部特異性，發(fā)現(xiàn) PRRSV 可抑制 SP-A 功能（下降 50%），導(dǎo)致肺泡表面張力異常，同時誘導(dǎo)炎癥小體 NLRP3 激活，使 IL-1β 分泌增加 4 倍，與 PRRSV 感染仔豬的肺間質(zhì)炎癥程度正相關(guān)（R2=0.92），研究結(jié)果較 SEP-K1 模型更接近在體狀態(tài)。

抗病du藥物篩選：建立基于病毒復(fù)制抑制率的高通量模型，某干擾素誘導(dǎo)劑可使 SEP-L2 細(xì)胞的 PRRSV 滴度下降 10?倍，且對細(xì)胞毒性較低（CC??/EC??比值達(dá) 25），小耳豬實(shí)驗(yàn)顯示該藥物可降低肺部病毒載量 70%，證實(shí)模型的應(yīng)用價值。

清肺藥物活性檢測：在 LPS 致肺損傷模型中，某中藥提取物可使細(xì)胞 SP-A 表達(dá)恢復(fù) 70%，TEER 值回升至正常水平的 85%，與小耳豬肺功能指標(biāo)（動脈血氧分壓上升 40%）的改善一致性達(dá) 90%（SEP-K1 模型僅 58%）。

肺部毒性評價：作為獸藥肺毒性篩選的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系，其對氨基糖苷類抗生素的敏感性與小耳豬在體毒性的相關(guān)性達(dá) 92%，可在 72 小時內(nèi)完成藥物安全劑量評估，較動物實(shí)驗(yàn)成本降低 65%。

培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL KGF，pH 維持在 7.2-7.4；為增強(qiáng)肺部功能模擬，可添加 10nM 地塞mi松，使 SP-A 表達(dá)量提升 30%。

傳代流程：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 70% 時，按 1:3 比例接種（低于 SEP-K1 的 1:4 比例），離心速度 800rpm，24 小時貼壁率超 92%，避免過度融合（＞80% 會導(dǎo)致屏障功能下降）。

凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達(dá) 89%，需檢測 SP-A 表達(dá)確認(rèn)功能穩(wěn)定。

肺損傷模型構(gòu)建：細(xì)胞接種 24 孔板，用 1μg/mL LPS 處理 24 小時，檢測 IL-8 釋放量（較正常組增加 4 倍）和 TEER 值下降幅度，結(jié)果變異系數(shù)＜7%；SEP-K1 對照組用于對比器官特異性差異。

病毒感染實(shí)驗(yàn)：接種 PRRSV（MOI=0.1）后，37℃培養(yǎng) 48 小時，通過 RT-PCR 檢測病毒 RNA 拷貝數(shù)（可達(dá) 10? copies/mL），適合抗病du藥物療效評估。

優(yōu)勢：

局限性：