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TECHNICAL ARTICLES詳細介紹
來源與形態:該亞株源自 CHO-K1 細胞系,經單細胞克隆或基因編輯技術篩選獲得。體外培養時呈典型上皮樣形態,貼壁生長,細胞呈多邊形,排列緊密且邊界清晰,較母系細胞形態更均一。在 37℃、5% CO?的培養條件下,增殖穩定,傳代周期約 2-3 天,可適應貼壁培養、懸浮培養及無血清培養基體系,高密度培養時細胞狀態仍能保持穩定。
遺傳特征:核型為非整倍體,染色體數目約 20-22 條,核型穩定性優于母系細胞,基因組背景清晰,無內源性病毒序列。部分亞株通過基因改造,缺失了特定代謝相關基因或引入抗性標記,更便于外源基因的篩選與穩定表達,長期傳代后仍能維持目標蛋白的表達穩定性。
重組蛋白高效生產
基因工程與藥物研發
細胞代謝與信號通路研究
優勢:遺傳穩定性高,實驗重復性好,能保證長期研究結果的一致性;蛋白表達效率優異,翻譯后修飾能力強,產物活性接近天然蛋白;培養適應性強,可在多種培養體系中生長,易于工業化放大;被國際監管機構認可,是生物藥生產的合規細胞系,應用范圍廣泛。
局限性:部分亞株對特定營養成分有特殊需求,增加了培養成本;長期懸浮培養可能出現細胞聚集體,影響蛋白產量與質量;對于某些結構異常復雜的蛋白,表達量可能較低,需進一步優化培養條件或進行細胞改造。
培養條件:常規使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基,添加青mei素 - 鏈mei素預防污染。若用于大規模生產,可采用無血清懸浮培養基,并根據亞株特性調整營養成分。培養過程中需控制細胞密度,貼壁培養時融合度不宜超過 85%,懸浮培養時密度保持在適宜范圍,避免過度密集影響細胞狀態。
污染防控:需定期檢測支原體、細菌等污染,可采用 PCR 或染色法進行監測。凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液,在液氮中長期保存,復蘇時 37℃水浴快速解凍,離心去除 DMSO 以減少細胞損傷,復蘇后建議傳代 1-2 次,待細胞狀態穩定后再用于實驗。
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型號:BY-1301
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