T84人結直腸癌細胞系
T84人結直腸癌細胞系是研究結直腸癌及腸屏障功能的重要模型，因具備典型的腸上皮細胞極性和穩定的屏障特性，在結直腸癌發病機制、腸黏膜屏障功能及藥物轉運研究領域應用廣泛，為解析結直腸癌的 “惡性增殖 - 屏障破壞" 雙重特征提供了可靠工具。
來源與背景：該細胞系于 1977 年從一名 61 歲男性結直腸癌患者的肺轉移灶中分離建立，雖源自轉移灶，但保留了豐富的腸上皮細胞特征。與其他結直腸癌細胞系（如 Caco-2）相比，其更貼近臨床結直腸癌的上皮表型，尤其適合研究結直腸癌對腸屏障功能的影響，為探索 “腫瘤細胞 - 腸黏膜微環境相互作用" 提供了理想樣本，填bu了結直腸癌與腸屏障關聯研究模型的空白。其明確的轉移來源和長期傳代穩定性，使其成為結直腸癌轉移與腸屏障功能研究的重要橋梁。
細胞特性：形態上呈柱狀上皮樣，貼壁生長，可形成連續的單層細胞，細胞排列緊密，呈極性分布，頂端可見微絨毛結構，細胞質豐富，細胞核呈橢圓形，位于細胞基底部，具有腸上皮細胞的典型形態特征。核心特性為強極性與屏障功能，體外培養可形成高電阻值的單層細胞屏障，跨上皮電阻（TEER）可達 1000-1500Ω?cm2，顯著高于多數結直腸癌細胞系，緊密連接蛋白（如 occludin、claudin-1）表達豐富，能有效限制溶質自由通過，模擬正常腸黏膜的屏障功能；腸上皮標志物表達，高表達細胞角蛋白 20（CK20）、黏蛋白 1（MUC1），部分表達絨毛蛋白（villin），符合結腸上皮細胞的分子表型；中等增殖與侵襲能力，體外培養時細胞倍增時間約 72-80 小時，克隆形成率約 35%，低于高度惡性的結直腸癌細胞系（如 HCT116），Transwell 實驗中侵襲能力中等，能分泌少量基質金屬蛋白酶（MMP-7），模擬結直腸癌轉移過程中的侵襲特性。傳代時采用常規消化液處理，傳代比例 1:2-1:3，因細胞連接緊密，需適當延長消化時間，連續傳代 50 次后仍保持極性和屏障功能，但 TEER 值可能下降 10%-15%。
培養條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM/Ham's F12 混合培養基，添加 2mM 谷an酰胺和 1% 抗菌混合液以維持細胞活性。培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養基，細胞密度維持在 50%-80% 之間，過度匯合會影響細胞極性。與其他腫瘤細胞系不同，其對培養表面的適應性較強，在膠原包被的培養板上生長更佳，能增強細胞極性和屏障功能。傳代時用常規消化液處理 5-6 分鐘，輕柔吹打避免損傷細胞極性結構，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復蘇后存活率可達 80% 以上，但屏障功能需在復蘇后 3-5 天才能wan全恢復。
檢測鑒定：經微生物篩查，無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染，符合實驗細胞質量標準。免疫熒光檢測顯示，緊密連接蛋白 occludin 在細胞頂端呈線性表達，CK20 陽性，CK7 陰性，符合結腸上皮細胞的免疫表型特征。跨上皮電阻測定證實其高 TEER 值，熒光素異硫氰酸酯（FITC）標記的右旋糖酐通透性實驗顯示其低通透性，驗證其屏障功能。染色體核型分析呈現亞三倍體核型，存在 17 號染色體三體、8 號染色體缺失等異常，與臨床結直腸癌轉移患者的遺傳學改變部分吻合。功能驗證實驗中，經腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）處理后，TEER 值顯著下降，緊密連接蛋白表達減少，模擬炎癥或腫瘤微環境對腸屏障的破壞；裸鼠腹腔接種后可侵襲腸壁組織，病理檢查可見腫瘤細胞破壞腸黏膜屏障，證實其體內侵襲特性。
應用領域：在發病機制研究中，該細胞系常用于解析結直腸癌對腸屏障功能的影響，研究發現其分泌的某些細胞因子（如 IL-6）可降低自身及鄰近正常腸上皮細胞的 TEER 值，破壞緊密連接結構，為理解結直腸癌如何突破腸屏障提供了關鍵線索。在藥物轉運研究中，是評估藥物經腸吸收的常用模型，因其具備完整的屏障功能和轉運蛋白表達，可用于研究藥物的跨上皮轉運機制，如某些口服藥物通過該細胞系的轉運效率與體內吸收情況高度相關，為藥物劑型優化提供實驗依據。在藥物篩選方面，適用于評估結直腸癌治療藥物對腸屏障功能的影響，通過檢測藥物對 TEER 值及緊密連接蛋白的影響，篩選既能抑制腫瘤生長又不破壞腸屏障的候選藥物，如某些靶向 EGFR 的抑制劑對其屏障功能影響較小。此外，該細胞系可用于研究結直腸癌轉移與腸黏膜免疫的相互作用，與巨噬細胞共培養可誘導其屏障功能下降，促進腫瘤細胞侵襲，為解析轉移微環境的形成機制提供實驗基礎。
該細胞系的優勢在于能穩定維持腸上皮極性和屏障功能，為研究 “結直腸癌發生發展中腸屏障的動態變化" 提供了理想模型。通過與其他低屏障功能的結直腸癌細胞系的對比實驗，可清晰區分結直腸癌不同階段的屏障功能差異，為結直腸癌的早期診斷和治療提供實驗依據。
總之，T84 人結直腸癌細胞系憑借其典型的腸上皮特征和穩定的屏障功能，成為連接結直腸癌研究與腸屏障功能研究的重要工具，為解析結直腸癌的發病機制、開發新型治療藥物及保護腸屏障功能提供了堅實的實驗基礎。
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