豬 CD163 表達與定位：高表達豬 CD163 受體（膜表面分子數達 7.5×10?/ 細胞，親本 MH-S 細胞幾乎不表達），主要定位于細胞膜與內體膜（與 4H11 抗體識別的病毒抗原定位模式不同）；Western blot 驗證顯示，表達的豬 CD163 分子量為 130kDa，與天然豬肺泡巨噬細胞的 CD163 分子量一致，且能被抗豬 CD163 單克隆抗體特異性識別（4H11 抗體無交叉反應）。

PRRSV 復制支持能力：對 PRRSV 的感染效率達 98%（親本 MH-S 細胞＜1%），病毒復制周期縮短至 16 小時（4H11 細胞無法支持病毒復制），胞內病毒 RNA 拷貝數達 101? copies/mL（是 ST-2014S 細胞的 5 倍）；病毒釋放效率達 75%，滴度穩定在 10?.2 TCID??/mL，可觀察到典型的細胞融合病變（親本細胞無病變），與豬肺泡巨噬細胞的病毒復制特征一致性達 90%。

免疫功能保留：保留小鼠巨噬細胞的天然免疫特征，表達 TLR4、TLR7 等模式識別受體，PRRSV 感染后分泌 TNF-α 達 650pg/10?細胞 / 24h（是 4H11 細胞的 30 倍），Ⅰ 型干擾素（IFN-β）表達量是親本細胞的 1.5 倍，可模擬病毒感染引發的免疫應答，較單純表達受體的非免疫細胞更接近在體狀態。

受體介導的宿主限制突破：通過該細胞系發現，豬 CD163 的 scavenger receptor cysteine-rich（SRCR）域 5 是 PRRSV 跨種感染的關鍵（刪除后病毒復制下降 99%），與小鼠同源蛋白的差異氨基酸位點（第 561 位亮an酸）決定了感染能力，4H11 抗體檢測證實該過程不依賴 PCV2 等其他病毒輔助，揭示 PRRSV 宿主范圍限制的分子基礎。

病毒適應性變異追蹤：在 MH-SCD163 細胞中連續傳代 PRRSV 50 次后，病毒 ORF5 基因出現 E159K 突變，與豬 - 鼠跨種傳代實驗的變異規律一致（R2=0.92），該突變使病毒對小鼠巨噬細胞的感染效率提升 8 倍，為評估 PRRSV 跨種傳播風險提供實驗依據。

病毒入侵路徑驗證：利用該細胞系結合 4H11 抗體（作為陰性對照），證實 PRRSV 通過 CD163 介導的內吞途徑入侵，與網格蛋白共定位率達 85%，內體酸化抑制劑可使入侵率下降 70%，明確 CD163 在病毒進入階段的核心作用，研究結果較傳統豬源細胞更易進行基因編輯驗證。

受體調控網絡發現：通過轉錄組分析發現，CD163 表達可上調小鼠巨噬細胞中 120 個與病毒復制相關的基因，其中 PI3K/Akt 通路激活是 PRRSV 復制的關鍵（抑制劑處理后病毒滴度下降 10?倍），為開發靶向宿主因子的抗病du藥物提供靶點。

受體阻斷劑篩選：建立基于 PRRSV-GFP 報告病毒的高通量篩選模型，某小分子化合物可特異性阻斷 CD163 與 PRRSV 的結合（IC??=2.3μM），在 MH-SCD163 細胞中使病毒復制下降 98%，且對 4H11 細胞無毒性（CC??＞100μM），豬肺泡巨噬細胞實驗驗證其抑制率達 90%，具備開發潛力。

跨種抗病毒策略評估：在該細胞系中篩選出的 CD163 單克隆抗體，可同時抑制 PRRSV 對豬巨噬細胞（抑制率 85%）和 MH-SCD163 細胞（抑制率 90%）的感染，與 4H11 抗體的病毒檢測功能結合，可實現 “阻斷 - 驗證" 一體化評價，加速廣譜抗病du藥物研發。

培養基與篩選：使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基，添加 5μg/mL 嘌呤霉素（維持 CD163 表達），pH 維持在 7.2-7.4；與 4H11 細胞不同，需定期通過流式細胞術檢測 CD163 表達（陽性率應＞95%），避免基因沉默導致功能丟失。

傳代與維護：當細胞密度達 1×10?個 /mL 時，按 1:4 比例稀釋傳代（無需離心），24 小時存活率超 90%；為保持巨噬細胞功能，每周添加 10ng/mL M-CSF，可使吞噬能力提升 20%（4H11 細胞無需此步驟）。

凍存與復蘇：采用含 10% DMSO 的wan全培養基，細胞密度 5×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，48 小時后檢測 CD163 表達（應恢復至凍存前水平），病毒敏感性驗證顯示 PRRSV 滴度波動＜10%。

PRRSV 感染優化：細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板，接種 PRRSV（MOI=0.1）后 37℃孵育 1 小時，換液后培養 48 小時，病毒滴度可達 10?.2 TCID??/mL（4H11 細胞無法檢測 PRRSV），結果變異系數＜7%，適合藥物篩選實驗。

受體功能驗證：通過 CRISPR 技術在 MH-SCD163 細胞中敲除 CD163，病毒感染率從 98% 降至 5% 以下，可作為陰性對照驗證受體依賴性，較 4H11 抗體的病毒檢測更能反映功能本質。

優勢：

局限性：