表型標志物表達：高表達集合管上皮細胞特異性標志物，如水通道蛋白 2（AQP2）、上皮鈉通道（ENaC），免疫熒光陽性率＞95%；同時表達髓質(zhì)特異性轉(zhuǎn)運蛋白尿素轉(zhuǎn)運蛋白 B（UT-B），其表達量為皮質(zhì)來源細胞的 8 倍，與原代髓質(zhì)集合管細胞水平一致。

病毒敏感性：對腺病毒（Ad5、Ad7 型）的感染效率達 95% 以上，48 小時病毒滴度可達 10?-10? TCID??/mL，感染后 20 小時出現(xiàn)典型細胞病變（細胞聚集成團、核內(nèi)包涵體形成）；對 BK 病毒等多瘤病毒也具有特異性敏感性，可檢測到病毒 DNA 復制，為腎移植后病毒感染研究提供模型。

髓質(zhì)功能模擬：在高滲環(huán)境（300mOsm/kg H?O）中可維持穩(wěn)定的細胞形態(tài)，AQP2 表達上調(diào) 3 倍，對水的重吸收效率達原代集合管細胞的 65%（通過放射性水通透實驗檢測）；能響應抗利尿激素（ADH）刺激，1 小時內(nèi)細胞內(nèi) cAMP 濃度升高 5 倍，模擬腎臟髓質(zhì)的尿濃縮功能。

腺病毒分離與鑒定：可用于從臨床樣本中分離腎臟嗜性腺病毒，如腎移植患者尿液樣本接種后，48 小時即可觀察到典型核內(nèi)包涵體，分離效率達 90%，較傳統(tǒng) HEK293 細胞縮短 16 小時，為腺病毒相關(guān)腎病的快速診斷提供技術(shù)支持。

腺病毒載體疫苗生產(chǎn)：因?qū)ο俨《镜母咝еС帜芰Γ捎糜谥亟M腺病毒載體疫苗的生產(chǎn)工藝優(yōu)化。在微載體培養(yǎng)系統(tǒng)中，重組腺病毒滴度達 10? PFU/mL，外源基因表達量較 HEK293 細胞提升 2 倍，疫苗中殘留宿主細胞蛋白＜50ng / 劑，符合人用疫苗生產(chǎn)標準。

尿濃縮功能機制解析：利用 RM-3 細胞研究 AQP2 的調(diào)控機制，發(fā)現(xiàn)低滲刺激可使 AQP2 從胞內(nèi)囊泡轉(zhuǎn)移至細胞膜（膜定位率提升 4 倍），該過程依賴微管蛋白聚合，阻斷后水重吸收效率下降 70%，為尿崩癥發(fā)病機制研究提供分子依據(jù)。

髓質(zhì)損傷模型構(gòu)建：通過缺血再灌注模擬建立髓質(zhì)損傷模型，RM-3 細胞在缺氧 4 小時復氧 12 小時后，細胞活力下降 45%，AQP2 表達下調(diào) 60%，同時伴有炎癥因子 IL-1β 分泌增加 8 倍，與人類急性腎損傷的髓質(zhì)病理特征高度一致，為髓質(zhì)保護藥物篩選提供平臺。

利尿藥物篩選：基于其對水重吸收的調(diào)控功能，建立高通量利尿藥物篩選模型。篩選出的新型 AQP2 抑制劑可使 RM-3 細胞水通透效率下降 65%，動物實驗顯示其利尿效果為呋sai米的 1.5 倍，且無電解質(zhì)紊亂副作用，為開發(fā)新型利尿藥提供候選分子。

靶向毒性評價：可用于評估藥物對腎臟髓質(zhì)的特異性毒性，通過檢測細胞活力、AQP2 表達及尿素轉(zhuǎn)運功能，建立髓質(zhì)毒性分級標準。例如，某抗生素在 50μg/mL 濃度下即可導致 RM-3 細胞 UT-B 表達下調(diào) 50%，與臨床報道的腎髓質(zhì)損傷特征一致，預測準確率達 83%。

培養(yǎng)基：DMEM/Ham's F12（1:1）培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸、5mM 尿素（維持髓質(zhì)細胞表型），pH 維持在 7.2-7.4，可加入 5ng/mL 血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）促進細胞增殖與功能維持。

傳代流程：當細胞融合度達 60% 時，棄舊培養(yǎng)基，PBS 洗滌 2 次，加入細胞解離液，37℃孵育 6-8 分鐘至細胞脫落，加入含血清的培養(yǎng)基終止解離，按 1:2 比例接種至預涂膠原蛋白的培養(yǎng)瓶（增強貼壁能力），避免機械吹打損傷細胞極性。

凍存保護：取對數(shù)生長期細胞，用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基重懸至密度 8×10?個 /mL，程序降溫后液氮保存，復蘇時 37℃水浴快速解凍，接種至預涂培養(yǎng)瓶，傳代 3 次待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后使用。

腺病毒接種：細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板，培養(yǎng) 48 小時至融合度 50%，用無血清培養(yǎng)基稀釋腺病毒（MOI=0.5），37℃吸附 2 小時，換含 2% 血清的維持液，72 小時后通過噬斑實驗測定病毒滴度，或通過免疫熒光檢測病毒 hexon 蛋白。

水通透功能檢測：在 Transwell 小室中培養(yǎng)細胞至形成單層，上室加入含熒光標記水的溶液，30 分鐘后檢測下室熒光強度，計算水通透系數(shù)，以此評估細胞的尿濃縮功能狀態(tài)。

優(yōu)勢：

局限性：