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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細胞-細胞系-BY-1408RM-2獼猴腎細胞系

RM-2獼猴腎細胞系
產(chǎn)品型號:BY-1408
簡要描述:

RM-2獼猴腎細胞系,上皮樣,貼壁生長,保留腎細胞特性,對多種病毒敏感,支持高效復(fù)制,適用于病毒分離、腎損傷研究及相關(guān)藥物篩選。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質(zhì)量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

RM-2獼猴腎細胞系
RM-2獼猴腎細胞系是從成年獼猴腎臟組織分離建立的上皮細胞系,因保留靈長類腎臟細胞的典型表型與功能特征,且對多種病毒具有廣譜敏感性,成為腎臟病毒學(xué)研究、腎損傷機制探索及泌尿系統(tǒng)藥物篩選的重要模型。其與人類腎細胞的高度同源性,為腎臟相關(guān)研究提供了接近臨床的實驗平臺,尤其在腎毒性評估與病毒疫苗研發(fā)中具有重要應(yīng)用價值。
一、細胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來源與建立背景

RM-2 細胞系源自健康獼猴的腎臟皮質(zhì)組織,通過組織塊培養(yǎng)法結(jié)合細胞解離技術(shù)獲得原代腎小管上皮細胞,經(jīng) 30 代連續(xù)傳代純化后建立穩(wěn)定細胞系(“RM" 代表獼猴,“2" 為該系列細胞的第 2 株克隆)。該細胞系保留了腎小管上皮細胞的分化特征,其建立填bu了靈長類腎臟細胞模型的空白,克服了嚙齒類模型與人類腎臟結(jié)構(gòu)差異大的局限,為腎臟疾病轉(zhuǎn)化研究提供了理想工具。
  1. 形態(tài)與生長特征

細胞呈典型上皮樣形態(tài),貼壁生長時呈多邊形,排列緊密如鋪路石狀,胞質(zhì)豐富且含細小顆粒,細胞核呈圓形或橢圓形位于細胞中央。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/Ham's F12 培養(yǎng)基,倍增時間約 38-44 小時,傳代比例 1:3 至 1:4,每周換液 2-3 次以維持細胞融合度在 60%-70%。細胞凍存復(fù)蘇存活率超 85%,連續(xù)傳代 50 次后仍保持穩(wěn)定的生長特性,核型分析顯示保留獼猴二倍體特征(2n=42),染色體畸變率<5%,符合實驗細胞質(zhì)量控制標(biāo)準。
  1. 功能特性

  • 表型標(biāo)志物表達:高表達腎小管上皮細胞特異性標(biāo)志物,如細胞角蛋白 18(CK18)、鈉 - 葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白 2(SGLT2),免疫熒光陽性率>95%;同時具有活躍的離子轉(zhuǎn)運功能,可通過檢測 Na?/K?-ATP 酶活性(達 110μmol Pi/mg protein/h)評估細胞功能完整性,與原代腎小管上皮細胞水平相當(dāng)。

  • 病毒敏感性:對多種病毒具有廣譜敏感性,尤其對脊髓灰質(zhì)炎病毒、腺病毒、腎綜合征出血熱病毒的感染效率達 90% 以上,48 小時病毒滴度可達 10?-10? TCID??/mL,感染后 24 小時出現(xiàn)典型細胞病變(細胞圓縮、脫落、形成空斑);對部分肝炎病毒也具有一定支持能力,可檢測到相關(guān)病毒抗原分泌,為肝 - 腎綜合征研究提供模型。

  • 腎臟功能模擬:在體外可形成極性單層結(jié)構(gòu),具有一定的尿液濃縮與物質(zhì)重吸收功能,對葡萄糖的重吸收率達 32%(通過放射性同位素標(biāo)記法檢測),能響應(yīng)血管緊張素 Ⅱ 的刺激(細胞內(nèi) Ca2?濃度升高 2 倍),模擬腎臟的生理調(diào)節(jié)過程。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 病毒學(xué)研究與疫苗研發(fā)

  • 病毒分離與鑒定:可用于從臨床樣本中分離腎臟嗜性病毒,如腎綜合征出血熱患者尿液樣本接種后,72 小時即可觀察到典型細胞病變,分離效率達 85%,較傳統(tǒng)細胞系縮短 12-24 小時,為疫情快速診斷提供技術(shù)支持。

  • 疫苗生產(chǎn)與評估:因?qū)顾杌屹|(zhì)炎病毒的高敏感性,可用于脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗的生產(chǎn)工藝優(yōu)化。在微載體培養(yǎng)系統(tǒng)中,病毒滴度達 10?.? TCID??/mL,單批次產(chǎn)量較轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)提升 6 倍,疫苗中殘留宿主細胞 DNA<10pg / 劑,符合 WHO 生物制品標(biāo)準。

  1. 腎臟疾病機制研究

  • 腎小管損傷模型構(gòu)建:通過特定藥物處理建立藥物性腎損傷模型,RM-2 細胞在一定濃度藥物作用 48 小時后,凋亡率達 38%,同時伴有腎損傷分子 1(KIM-1)表達上調(diào) 7 倍,與人類藥物性腎損傷的分子特征高度一致,為研究腎小管修復(fù)機制提供平臺。

  • 腎臟纖維化研究:在 TGF-β1 刺激下,RM-2 細胞可發(fā)生上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達上調(diào) 5 倍,膠原分泌量增加 3 倍,模擬腎臟纖維化的病理過程,用于篩選抗纖維化藥物。

  1. 藥物腎毒性評價與篩選

  • 腎毒性預(yù)測:可用于評估藥物的腎臟安全性,通過檢測細胞活力、乳酸脫氫酶釋放及 KIM-1 分泌,建立藥物腎毒性分級標(biāo)準。例如,某非甾體抗炎藥在一定濃度下即可導(dǎo)致 RM-2 細胞活力下降 50%,與臨床報道的腎毒性劑量一致,預(yù)測準確率達 82%。

  • 腎臟保護藥物篩選:基于藥物損傷模型,篩選具有腎保護作用的化合物。發(fā)現(xiàn)某天然產(chǎn)物衍生物可將藥物誘導(dǎo)的細胞凋亡率從 38% 降至 14%,同時降低活性氧(ROS)水平 28%,動物實驗顯示其可改善藥物導(dǎo)致的腎功能損傷(血肌酐水平下降 38%),為腎保護藥物研發(fā)提供候選分子。

三、培養(yǎng)與實驗操作要點
  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基:DMEM/Ham's F12(1:1)培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 維持在 7.2-7.4,可加入 5ng/mL 表皮生長因子(EGF)促進細胞增殖與功能維持。

  • 傳代流程:當(dāng)細胞融合度達 70%-80% 時,棄舊培養(yǎng)基,PBS 洗滌 2 次,加入細胞解離液,37℃孵育 4-5 分鐘至細胞脫落,加入含血清的培養(yǎng)基終止解離,按 1:3 比例接種至新培養(yǎng)瓶,避免過度融合導(dǎo)致細胞極性丟失。

  • 凍存保護:取對數(shù)生長期細胞,用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基重懸至密度 1×10?個 /mL,程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇時 37℃水浴快速解凍,離心去除 DMSO 后接種,傳代 2 次待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后使用。

  1. 病毒培養(yǎng)與功能實驗操作

  • 病毒接種:細胞以 3×10?個 / 孔接種 24 孔板,培養(yǎng) 24 小時至融合度 60%,用無血清培養(yǎng)基稀釋病毒(MOI=0.1),37℃吸附 1 小時,換含 2% 血清的維持液,72 小時后通過 TCID??法測定病毒滴度,或通過免疫熒光檢測病毒抗原。

  • 腎毒性檢測:細胞以 5×103 個 / 孔接種 96 孔板,培養(yǎng) 24 小時后加入梯度濃度藥物,繼續(xù)培養(yǎng) 48 小時,通過 CCK-8 法檢測細胞活力,同時收集上清檢測 KIM-1 含量,綜合評估藥物腎毒性。

四、優(yōu)勢與局限性
  • 優(yōu)勢

  1. 靈長類模型優(yōu)勢:與人類腎臟細胞的基因同源性達 94% 以上,生物學(xué)特征高度相似,研究結(jié)果的臨床轉(zhuǎn)化價值顯著高于嚙齒類模型。

  1. 功能完整性:保留腎小管上皮細胞的病毒敏感性與腎臟功能特征,可模擬體內(nèi)腎臟的生理與病理過程,適合多領(lǐng)域研究。

  1. 應(yīng)用范圍廣:既可用于病毒學(xué)研究與疫苗生產(chǎn),又能支撐腎臟疾病機制探索與藥物篩選,適用場景多樣。

  • 局限性

  1. 來源限制:獼猴為保護動物,細胞系獲取受倫理與資源限制,成本較高。

  1. 培養(yǎng)要求高:對培養(yǎng)基成分敏感,無血清培養(yǎng)時細胞活力下降 28%,增加大規(guī)模應(yīng)用難度。

  1. 結(jié)構(gòu)單一性:僅模擬腎小管上皮細胞功能,缺乏腎小球、腎間質(zhì)等結(jié)構(gòu),無法wan全復(fù)制腎臟的復(fù)雜微環(huán)境。

五、研究意義與展望
RM-2 獼猴腎細胞系的建立為腎臟相關(guān)研究提供了重要工具,其在病毒疫苗研發(fā)中的應(yīng)用,推動了脊髓灰質(zhì)炎等疫苗的生產(chǎn)工藝優(yōu)化;在腎臟疾病研究中,助力解析腎小管損傷與修復(fù)機制,為腎病治療提供新靶點。未來,通過基因編輯技術(shù)引入人源化病毒受體或疾病相關(guān)突變基因,可進一步提升模型的臨床相關(guān)性;結(jié)合器官芯片技術(shù)構(gòu)建 “腎臟芯片" 模型,有望模擬完整腎臟功能,為藥物研發(fā)與疾病研究提供更接近體內(nèi)的實驗平臺。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯(lián)系我們。

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