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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1367V79中國倉鼠肺細胞系

V79中國倉鼠肺細胞系
產品型號:BY-1367
簡要描述:

V79中國倉鼠肺細胞系,成纖維樣,貼壁生長,突變率低且代謝活躍,對誘變劑敏感,適用于基因突變測試、細胞毒性評估及輻射效應研究。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

V79中國倉鼠肺細胞系
V79中國倉鼠肺細胞系是源自中國倉鼠肺組織的永生化細胞模型,因成纖維樣形態典型、自發突變率低且代謝活性強,成為基因突變測試、細胞毒性評估及輻射生物學研究的重要工具。其保留肺成纖維細胞的核心特征,兼具遺傳背景穩定與環境響應敏感的雙重優勢,為體外遺傳毒理學研究提供了標準化實驗平臺。
一、細胞來源與基本特性
  • 來源與永生化:該細胞系源自中國倉鼠成年肺組織,經原代培養與克隆篩選獲得永生化株系,“V79" 命名源自早期克隆編號。原代細胞通過酶解法分離,經 50 代連續傳代篩選出增殖穩定的單克隆,永生化過程未引入外源基因,主要依賴體外培養壓力實現,全基因組測序顯示其與原代肺成纖維細胞遺傳相似度>97%,核型分析證實染色體數目為 2n=22,核型穩定性優于多數成纖維細胞系(傳代 100 次核型畸變率<2%)。

  • 形態與增殖:體外培養呈典型成纖維樣形態,貼壁生長時呈長梭形,胞體細長且胞質伸展明顯,細胞排列呈平行或漩渦狀;懸浮培養易聚集成團,故以貼壁培養為主。37℃、5% CO?條件下,增殖周期約 24-28 小時,較 CHL 細胞更短,適應含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基,傳代 150 次以上生長速率衰減<10%,自發突變率<1×10??,凍存復蘇后存活率超 88%。

  • 功能特征:核心優勢在于低背景突變與高代謝活性:HGPRT(次黃piao呤鳥piao呤磷酸核糖轉移酶)基因自發突變率極低(<5×10??),便于基因突變事件的檢測;Ⅰ 相代謝酶(如 CYP1A1)表達量較 CHL 細胞高 30%,可直接代謝部分前致突變物,無需額外添加代謝活化系統,符合 OECD 476 基因突變測試指南要求。同時,其對輻射損傷響應靈敏,γ 射線照射后 DNA 雙鏈斷裂標志物 γH2AX 焦點形成效率較普通細胞高 25%。

二、核心應用領域
  1. 基因突變測試

該細胞系是哺乳動物細胞基因突變試驗的標gan模型,廣泛用于化學品與環境污染物的致突變性評估。在 HGPRT 基因突變試驗中,受試物處理后可通過 6 - 硫代鳥piao呤抗性克隆計數量化突變率,對甲基磺酸乙酯等標準誘變劑的檢測靈敏度達 100%,結果變異系數<8%。在 TK 基因突變試驗中,其可同時檢測點突變與染色體畸變,為誘變劑作用機制分析提供更全面數據;在新藥研發早期,其能快速篩選出具有潛在致突變風險的候選化合物,篩選效率較細菌回復突變試驗提升 40%。
  1. 細胞毒性與代謝研究

因代謝活性強,V79 細胞成為細胞毒性與代謝交互作用研究的理想模型。通過中性紅攝取法或 ATP 含量測定,可精準評估受試物的細胞毒性(IC50 測定誤差<5%),對脂溶性化合物的代謝轉化效率較 CHL 細胞高 20%,能更真實反映體內毒性效應。在納米材料毒性研究中,其可通過胞內 ROS 水平檢測反映納米顆粒的氧化損傷潛力(如 50nm TiO?顆粒可誘導 ROS 升高 2.1 倍),為納米材料的構效關系分析提供依據。
  1. 輻射生物學效應研究

該細胞系對電離輻射與紫外線敏感,是輻射損傷機制研究的常用模型。在 γ 射線照射實驗中,其存活曲線的 D0 值(平均致死劑量)為 1.2Gy,較 CHL 細胞低 30%,便于輻射敏感性分析;紫外線照射后,其核苷酸切除修復速率可通過溴脫氧尿苷摻入實驗量化,為 DNA 損傷修復機制研究提供可視化平臺。在輻射防護劑篩選中,其能快速評估候選藥物對輻射誘導突變的抑制效應(如氨lin汀可使突變率降低 55%),加速輻射防護藥物的研發進程。
三、培養方法
  • 貼壁培養操作

  1. 復蘇:凍存管 37℃水浴 1 分鐘解凍,轉移至含 10mL 預熱培養基(DMEM+10% 胎牛血清)的離心管,1000rpm 離心 5 分鐘,重懸后接種至 T75 瓶,37℃、5% CO?培養,24 小時貼壁率超 90%。

  1. 換液:接種 24 小時后首ci換液,去除未貼壁細胞,此后每 2 天換液一次,維持細胞密度在 1×10?-5×10?個 /cm2(密度過高會降低代謝活性)。

  1. 傳代:融合度達 70%-80% 時,棄培養基,PBS 清洗 2 次,加 2mL 細胞解離液,37℃孵育 2 分鐘,鏡檢細胞脫落后加 8mL 培養基終止,按 1:5 比例傳代,避免過度融合導致形態改變。

  • 基因突變測試流程

  1. 細胞準備:對數期細胞以 2×10?個 / 皿接種 100mm 培養皿,培養 24 小時后加入受試物,處理 4-24 小時(依受試物特性調整)。

  1. 表達培養:去除受試物,新鮮培養基培養 7-10 天(讓突變表型表達),期間每 3 天換液一次。

  1. 突變克隆計數:加入選擇培養基(含 6 - 硫代鳥piao呤 5μg/mL),培養 10-14 天后計數抗性克隆,計算突變頻率(每 10?存活細胞的突變克隆數)。

  • 凍存流程:取對數生長期細胞,1000rpm 離心 5 分鐘,凍存液(70% DMEM+20% 胎牛血清 + 10% DMSO)重懸至 6×10?個 /mL,分裝凍存管,程序降溫盒 - 80℃過夜后移至液氮,保存期超 5 年,復蘇后傳代 1-2 次即可用于實驗。

四、優勢與局限性
  • 優勢:自發突變率低(<1×10??),基因突變檢測準確性高;代謝活性強,可直接代謝多數前致突變物;對輻射與化學誘變劑敏感性高,檢測下限低;傳代穩定性好,150 代內生物學特性無顯著改變;培養周期短,實驗效率優于 CHL 細胞。

  • 局限性:成纖維細胞特性限制其在上皮細胞特異性毒性研究中的應用;部分水溶性極差的受試物需添加助溶劑(可能影響代謝活性);長期傳代(>180 次)可能出現代謝酶活性下降(約 15%),需定期復蘇早期凍存株。

五、研究意義
V79 細胞系的建立為哺乳動物細胞基因突變研究提供了高靈敏度模型,其低背景突變與高代謝活性的特性推動了遺傳毒理學測試體系的標準化。在基礎研究中,其助力闡明化學誘變劑與輻射的致突變機制,為 DNA 損傷修復通路研究提供關鍵工具;在應用領域,其作為國際認可的遺傳毒性測試模型,支撐了數千種化學品的安全性評估,尤其在新藥研發與環境污染物風險評價中發揮不可替代作用,是連接體外毒理學研究與人類健康風險評估的重要橋梁。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

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