LSC羔羊睪丸支持細胞系
LSC羔羊睪丸支持細胞系作為針對羔羊睪丸支持組織的特異性細胞模型，在反芻動物生殖發育機制、精子發生調控及生殖疾病研究領域具有重要價值。它的建立為深入探究羔羊睪丸支持細胞的分化規律、生精微環境構建以及生殖系統相關疾病的發生路徑等提供了穩定的體外研究平臺，對羔羊生殖機能調控和反芻動物繁育研究意義重大。
睪丸支持細胞是睪丸內的關鍵細胞類型，承擔著營養生殖細胞、構建生精小管屏障、分泌生殖相關因子等重要功能，對精子發生和雄性生殖機能維持起著決定性作用。羔羊階段是睪丸發育和生殖機能建立的關鍵時期，這一階段支持細胞的增殖與分化直接影響成年后的繁殖能力。由于傳統的體內研究難以精準解析支持細胞與生殖細胞的互作機制，且原代支持細胞培養存在傳代受限、穩定性不足等問題，因此建立 LSC 羔羊睪丸支持細胞系，成為解析反芻動物生殖發育奧秘、推動繁育技術發展的重要突破口。
LSC 羔羊睪丸支持細胞系的建立經過了嚴謹規范的操作流程。選取健康的新生羔羊，在無菌條件下取出睪丸組織，去除被膜和血管。將睪丸實質剪切成 1mm3 左右的小塊，用含雙抗的磷酸鹽緩沖液反復沖洗，以清除血液和雜質。加入細胞分散液，在 37℃條件下處理 40-50 分鐘，期間每隔 10 分鐘輕輕吹打一次使細胞分散。收集細胞懸液，經 70μm 細胞濾網過濾后，1200r/min 離心 8 分鐘，棄上清，用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養液重懸細胞，接種于培養瓶中，置于 37℃、5% CO?恒溫培養箱中進行原代培養。培養初期，每 24 小時更換一次培養液以去除非貼壁細胞，待細胞匯合度達 75% 時進行傳代，目前該細胞系已穩定傳代至 50 代以上，細胞活力保持在 90% 以上。
該細胞系呈現典型的不規則星形形態，細胞輪廓清晰，胞體伸展呈多角狀，有多個長短不一的胞質突起，相鄰細胞的突起可相互連接形成網狀結構，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，具有較強的貼壁生長能力。生長特性研究顯示，LSC 細胞在 DMEM/F12 培養液中生長狀態最佳，相較于單純 DMEM 培養液，細胞增殖速度提高約 22%；最適培養溫度為 37℃，與哺乳動物體溫相符；當胎牛血清濃度為 10% 時，細胞群體倍增時間最短，約為 72 小時。傳代至 40 代后，細胞形態和增殖速率無明顯變化，核型分析表明其染色體數目穩定（保持羔羊正常的染色體數目），遺傳背景可靠，仍保留睪丸支持細胞的特性。
在功能特性方面，LSC 羔羊睪丸支持細胞系展現出豐富的生殖細胞功能。免疫熒光檢測發現，細胞高表達睪丸支持細胞特異性標志物如波形蛋白、轉鐵蛋白和 FSH 受體，證實其支持細胞屬性。該細胞系具有分泌雄激素結合蛋白（ABP）和抑制素的能力，ELISA 檢測顯示培養液中 ABP 濃度可達 25ng/mL，這對維持體外生精微環境具有重要意義。同時，LSC 細胞在體外可與精原細胞共培養并促進其增殖分化，共培養體系中精原細胞存活率較單獨培養提高 40%，為研究支持細胞與生殖細胞的互作機制提供了理想模型。此外，該細胞系對生殖系統相關病原體如布魯氏菌表現出一定的敏感性，感染后會出現細胞形態改變和功能異常，為研究病原體對雄性生殖機能的影響提供了良好材料。
LSC 羔羊睪丸支持細胞系在多個研究領域應用廣泛。在生殖發育研究中，通過對該細胞系進行基因沉默實驗，揭示了 Kit ligand 基因在精原細胞增殖中的關鍵調控作用；在繁育技術方面，利用該細胞系建立了體外生精模型，為人工輔助生殖技術提供了新的思路；在獸醫病理學研究中，通過細胞損傷模型模擬睪丸炎病理過程，闡明了炎癥因子對支持細胞功能的影響機制。
作為穩定可靠的羔羊睪丸支持細胞模型，LSC 不僅填bu了反芻動物睪丸支持細胞長期體外培養的空白，更為反芻動物生殖生物學及繁育技術研究提供了重要工具，推動了羔羊生殖機能調控和優良品種培育技術的發展，對提升畜牧業生產效益具有重要意義。
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