2nFC二倍體紅鯽尾鰭細胞系
2nFC二倍體紅鯽尾鰭細胞系作為針對二倍體紅鯽尾鰭組織的特異性細胞模型,在淡水魚類發育機制、遺傳特性研究及尾鰭再生機制探索領域具有重要價值。它的建立為深入探究紅鯽尾鰭細胞的分化規律、遺傳物質穩定性以及尾鰭損傷后的修復路徑等提供了穩定的體外研究平臺,對紅鯽這一淡水經濟魚類的育種改良和細胞生物學研究意義重大。
二倍體紅鯽作為我國常見的淡水魚類,不僅具有重要的經濟價值,其獨te的遺傳特性和尾鰭再生能力也使其成為魚類生物學研究的理想材料。尾鰭作為魚類運動和平衡的重要器官,其正常發育和損傷后的高效再生對魚類的生存至關重要。尾鰭的再生過程涉及細胞的增殖、分化、遷移以及組織的重新構建,任何環節出現異常都可能影響再生效果。由于紅鯽在自然環境中的研究受諸多因素限制,傳統的研究方法難以精準解析尾鰭再生的分子機制,因此建立 2nFC 二倍體紅鯽尾鰭細胞系,成為解析其尾鰭發育與再生奧秘、推動魚類育種技術發展的重要突破口。
2nFC 二倍體紅鯽尾鰭細胞系的建立經過了嚴謹規范的操作流程。選取健康的二倍體紅鯽成魚,在無菌條件下剪取少量尾鰭組織(非損傷性取樣),用含雙抗的磷酸鹽緩沖液反復沖洗,以清除表面的黏液和雜質。將尾鰭組zhi剪切成 1mm3 左右的小塊,加入細胞分散液,在 28℃條件下處理 30-35 分鐘,期間每隔 5 分鐘輕輕吹打一次使細胞分散。收集細胞懸液,經 70μm 細胞濾網過濾后,1000r/min 離心 5 分鐘,棄上清,用含 10% 胎牛血清的 L-15 培養液重懸細胞,接種于培養瓶中,置于 28℃恒溫培養箱中進行原代培養(魚類細胞培養通常無需 CO?環境)。培養初期,每 3 天更換一次培養液,待細胞匯合度達 80% 時進行傳代,目前該細胞系已穩定傳代至 50 代以上,細胞活力保持在 85% 以上。
該細胞系呈現典型的成纖維樣形態,細胞呈長梭形,排列疏松且有一定的方向性,胞質均勻,細胞核呈橢圓形,具有較強的貼壁生長能力。生長特性研究顯示,2nFC 細胞在 L-15 培養液中生長狀態最佳,相較于其他培養液,細胞增殖速度提高約 18%;最適培養溫度為 28℃,與紅鯽的生存水溫相符;當胎牛血清濃度為 10% 時,細胞群體倍增時間最短,約為 65 小時。傳代至 40 代后,細胞形態和增殖速率無明顯變化,核型分析表明其染色體數目穩定(保持二倍體紅鯽正常的染色體數目),遺傳背景可靠,仍保留尾鰭細胞的特性。
在功能特性方面,2nFC 二倍體紅鯽尾鰭細胞系展現出豐富的尾鰭細胞功能。免疫熒光檢測發現,細胞高表達成纖維細胞特異性標志物如波形蛋白、Ⅰ 型膠原蛋白,證實其尾鰭成纖維細胞屬性。該細胞系具有較強的增殖能力和遷移能力,在體外劃痕實驗中,細胞能快速向劃痕區域遷移并增殖,模擬尾鰭損傷后的修復過程,這對研究尾鰭再生的細胞機制具有重要意義。同時,2nFC 細胞在受到特定細胞因子刺激時,會表現出與尾鰭再生相關的基因表達變化,如成纖維細胞生長因子(FGF)表達上調等,為研究尾鰭再生的分子調控機制提供了理想模型。此外,該細胞系對魚類常見的病原體如鯉春病毒血癥病毒表現出一定的敏感性,感染后會出現細胞病變效應,為研究魚類病毒與宿主細胞的相互作用提供了良好材料。
2nFC 二倍體紅鯽尾鰭細胞系在多個研究領域應用廣泛。在尾鰭再生研究中,通過對該細胞系進行基因編輯實驗,揭示了 Wnt 信號通路在尾鰭再生中的關鍵調控作用;在遺傳育種方面,利用該細胞系開展了染色體穩定性研究,為二倍體紅鯽的遺傳改良提供了理論依據;在環境毒理學研究中,建立了基于該細胞系的毒性檢測模型,用于評估水體污染物對魚類細胞的影響。
作為穩定可靠的二倍體紅鯽尾鰭細胞模型,2nFC 不僅填bu了紅鯽尾鰭細胞體外研究的空白,更為淡水魚類細胞生物學及育種研究提供了重要工具,推動了紅鯽尾鰭再生機制研究和優良品種培育技術的發展,對提升淡水漁業的經濟效益具有重要意義。
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