ZEBDanio rerio ZEB斑馬魚胚胎細胞系
在生命科學研究領域,斑馬魚憑借與人類基因高度同源、繁殖速度快、胚胎透明等優勢,成為發育生物學、遺傳學及藥物研發的重要模式生物。ZEBDanio rerio ZEB斑馬魚胚胎細胞系的建立,為體外研究斑馬魚胚胎發育機制、基因功能及疾病模型提供了穩定的細胞平臺。
斑馬魚(Danio rerio)是一種小型熱帶淡水魚,其胚胎在體外發育且通體透明,便于實時觀察細胞分化和器官形成過程。胚胎細胞作為個體發育的起始細胞,具有多向分化潛能,蘊含著生命發育的核心信息。ZEBD 細胞系源自斑馬魚早期胚胎組織,保留了胚胎細胞的增殖活性和分化潛力,為解析胚胎發育的分子機制提供了理想材料。
該細胞系的建立經過精細的無菌操作流程。選取受精后 24 小時的斑馬魚胚胎,在無菌環境下去除卵膜,用含抗菌成分的緩沖液沖洗 3-4 次以清除卵黃物質。將胚胎組zhi剪碎后,加入細胞分散液處理 15-20 分鐘,收集單細胞懸液并經濾網過濾,離心純化后,用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養液重懸,置于 28℃、5% CO?培養箱中進行原代培養。初期每 1-2 天更換培養液,待細胞匯合度達 80% 時進行傳代,目前已穩定傳代至 60 代以上,細胞活力始終保持在 90% 以上。
ZEBD 細胞系呈現典型的上皮樣形態,細胞呈多邊形,緊密排列成單層,具有較強的貼壁生長能力。在生長特性研究中發現,其最適培養溫度為 28℃,相較于哺乳動物細胞培養溫度更接近斑馬魚生理環境;當胎牛血清濃度為 12% 時,細胞群體倍增時間最短,約為 36 小時。傳代至 40 代后,細胞形態和增殖速率無明顯變化,核型分析顯示其染色體數目穩定,表明該細胞系具有良好的遺傳穩定性。
在功能特性方面,ZEBD 細胞系展現出顯著的胚胎細胞特性。通過誘導實驗發現,在特定細胞因子作用下,該細胞可分化為神經樣細胞、心肌樣細胞等多種細胞類型,為研究細胞分化的調控網絡提供了體外模型。同時,該細胞系對外源基因轉染效率較高,轉染后綠色熒光蛋白表達均勻且持續時間長,適用于基因過表達或敲除實驗,為解析特定基因在胚胎發育中的作用機制提供了有力工具。
ZEBD 細胞系在多個研究領域具有廣泛應用。在發育生物學研究中,通過檢測細胞中發育相關基因的表達變化,揭示了 Wnt、BMP 等信號通路在胚胎軸形成中的調控作用;在藥物篩選方面,利用該細胞系建立了心臟毒性評估模型,可快速檢測藥物對胚胎心肌細胞的影響,為新藥研發提供早期安全評價依據;在疾病模型研究中,通過誘導細胞發生特定基因突變,成功模擬了人類先天性心臟病的細胞表型,為疾病機制研究和治療靶點發現奠定基礎。
作為穩定可靠的斑馬魚胚胎細胞模型,ZEBDanio rerio ZEB 細胞系不僅推動了斑馬魚基礎研究的深入開展,更為人類疾病的體外模擬和藥物研發提供了高效平臺,在生命科學研究中具有不可替代的價值。
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