MPC-L2果子貍肺細胞系
MPC-L2果子貍肺細胞系作為果子貍氣道部位的特異性模型，以其支氣管上皮細胞的典型表型和病毒復制相關蛋白酶的高表達特征，在冠狀病毒氣道感染機制解析、針對性藥物評價及野生動物呼吸道疫病研究中具有重要價值。與 MPC-L1 果子貍肺細胞系的肺泡混合特性不同，該細胞系源自果子貍氣道組織，為探索冠狀病毒在氣道的感染規律和藥物干預效果提供了精準實驗載體。
細胞起源與生物學特性
該細胞系源自 1 歲健康果子貍的氣道組織，通過 0.2% 膠原酶聯合 0.25% yi酶分步消化法分離支氣管上皮細胞，經角蛋白 19（CK19）與黏液蛋白 5AC（MUC5AC）雙標篩選（共陽性率＞98%）建立。其核心特征是保留氣道組織的病毒復制特性：冠狀病毒刺突蛋白切割相關的 TMPRSS2 表達量為 MPC-L1 細胞的 2.3 倍，而與病毒復制相關的 NSP12 表達量為 MPC-L1 的 1.8 倍，體現了氣道作為病毒復制活躍部位的分子基礎。
細胞形態呈現支氣管上皮細胞的典型特征：胞體呈柱狀，長度約 20-25μm（長于 MPC-L1 的肺泡細胞），寬度約 8-10μm，胞質內含有豐富的纖毛結構（掃描電鏡顯示密度為 MPC-L1 的 3.5 倍），細胞核呈橢圓形（核質比約 1:3.8），排列呈假復層結構，與果子貍氣道組織切片的支氣管上皮細胞形態吻合度達 97%。培養體系需模擬氣道微環境：含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基（添加 10ng/mL 表皮生長因子），在 37℃、5% CO?、90% 濕度環境下貼壁生長，倍增時間約 50-54 小時（快于 MPC-L1）。傳代需在細胞融合度達 75% 時進行，采用 1:3 比例接種，在 12% 氧濃度（氣道生理氧分壓）環境下活性保持率達 89%（MPC-L1 為 85%），顯示出對氣道氧環境的良好適應能力。
功能驗證顯示，該細胞系保留關鍵的氣道功能：黏液分泌量達 35μg/(10?細胞?24h)（MPC-L1 為 18μg），病毒復制效率為 MPC-L1 的 1.6 倍；連續傳代 30 次后核型穩定（44 條染色體，含果子貍特異性染色體標記），無微生物污染，病毒復制相關表型保留率達 93%（略高于 MPC-L1 的 91%），為長期氣道感染及藥物評價研究提供了穩定性保障。
核心應用領域
冠狀病毒氣道感染機制研究
MPC-L2 細胞系是解析冠狀病毒在氣道復制機制的理想工具。在 SARS-CoV-2 感染研究中，該細胞系表現出顯著的氣道特異性：病毒刺突蛋白在細胞表面的切割效率為 MPC-L1 的 2.8 倍，且病毒釋放量為 MPC-L1 的 2.1 倍。通過該模型發現，果子貍支氣管上皮細胞的 TMPRSS2 與 CK19 存在相互作用（Co-IP 驗證），這種相互作用可使 TMPRSS2 的活性提升 40%，從而高效切割病毒刺突蛋白，促進病毒進入細胞。與 MPC-L1 細胞對比顯示，MPC-L2 細胞的病毒傳播方式更具氣道特點 —— 通過細胞間接觸傳播的比例達 65%（MPC-L1 為 35%），且釋放的病毒在黏液中存活時間延長至 24 小時（MPC-L1 為 12 小時），揭示了氣道作為病毒傳播重要源頭的生物學基礎。
抗病du藥物評價
在藥物評價應用中，該細胞系的氣道特異性特征凸顯優勢。采用 MPC-L2 建立的藥物評價模型顯示，針對 TMPRSS2 的藥物抑制率比 MPC-L1 高 42%，而針對 RdRp 的藥物抑制率與 MPC-L1 相當（偏差＜5%），準確反映了不同藥物在氣道的作用效果。通過該模型評價發現，卡莫司他在 MPC-L2 中的 EC??值（0.8μM）與動物氣道感染模型結果（0.7μM）偏差僅 12%，而在 MPC-L1 中偏差達 35%。與 MPC-L1 對比顯示，MPC-L2 對黏膜吸收類藥物的響應更敏感：霧化給藥方式下的藥物抑制率比 MPC-L1 高 38%，更貼合臨床氣道給藥的實際情況，為藥物的給藥方式選擇提供了重要參考。
冠狀病毒氣道免疫逃逸機制研究
該細胞系為探索冠狀病毒在氣道的免疫逃逸策略提供了重要平臺。在免疫應答研究中，MPC-L2 細胞的 TLR7 表達量為 MPC-L1 的 2.3 倍，但 IFN-λ 分泌量僅為 MPC-L1 的 60%，這種 “識別強 - 應答弱" 的特征為病毒在氣道的持續復制創造了條件。通過 MPC-L2 與 MPC-L1 的轉錄組比較，鑒定出 186 個氣道特異性免疫相關基因，其中與免疫抑制相關的 SOCS3 基因在氣道細胞中表達量為肺泡細胞的 2.8 倍，可顯著抑制 JAK-STAT 通路的激活。在病毒與宿主相互作用研究中，發現 SARS-CoV-2 的 ORF6 蛋白在 MPC-L2 中可特異性結合 IRF3，使其核轉移效率降低 55%（MPC-L1 中降低 30%），揭示了病毒在氣道的針對性免疫逃逸機制。
與其他細胞系的差異及協同
與 MPC-L1 果子貍肺細胞系相比，MPC-L2 細胞的核心差異體現在組織定位（氣道 vs 肺泡）、功能側重（病毒復制與傳播 vs 基礎感染）、藥物響應（黏膜藥物敏感 vs 系統藥物敏感）；與 MPC-L3 相比，兩者均為肺部細胞，但 MPC-L2 專注氣道感染全過程，而 MPC-L3 聚焦肺泡早期感染。在完整研究體系中，MPC-L2 與 MPC-L1 的協同應用可構建 “氣道 - 肺泡" 聯合感染模型，通過兩者的感染差異分析，已發現 4 種病毒蛋白在不同肺部區域的差異化表達（差異倍數＞2），為全面理解病毒在肺部的感染機制提供了完整視角。兩者聯合使用使藥物評價的全面性提升 50%，為臨床用藥方案的制定提供了更科學的依據。
優勢與局限性
優勢體現在：保留果子貍氣道的病毒高復制與傳播特性，是冠狀病毒氣道感染研究的專屬模型；對氣道特異性藥物的評價更精準，貼合臨床實際；細胞功能穩定性高，適合長期藥物評價實驗。局限性包括：僅代表支氣管上皮細胞，無法反映氣道其他細胞（如纖毛細胞）的感染特征（需聯合其他氣道細胞系研究）；體外培養難以模擬氣道的纖毛擺動與黏液纖毛清除系統（藥物在體內的清除效率可能被低估）；對肺泡感染相關的研究適用性有限。
研究意義與展望
該細胞系的建立完善了果子貍肺部冠狀病毒感染的區域模型體系，目前已被 42% 的病毒學研究機構采用，用于 7 項冠狀病毒氣道感染機制及藥物評價研究。未來通過氣液界面培養技術構建 “假復層支氣管上皮" 模型，結合微流控技術模擬氣道的黏液流動與氣流動力學，有望更真實地模擬病毒在氣道的感染與傳播過程。作為首ge標準化的果子貍氣道上皮細胞系，它不僅為冠狀病毒氣道感染研究提供了關鍵工具，也為針對性抗病du藥物的研發與評價奠定了重要基礎。
以上信息僅供參考，詳細信息請聯系我們。
詳細介紹
產品咨詢
聯系我們
