病毒敏感性：保留對冠狀病毒的高易感性，感染 SARS-CoV-2 后 48 小時病毒滴度達 10? TCID??/mL，與貼壁 Vero E6 細胞相當(dāng)；對中東呼吸綜合征冠狀病毒（MERS-CoV）、寨卡病毒等也具有敏感性，滴度較貼壁培養(yǎng)提升 10%-15%。

受體表達：血管緊張素轉(zhuǎn)換酶 2（ACE2）表達量達 9×10?分子 / 細胞（流式檢測），與貼壁細胞無顯著差異，為冠狀病毒入侵提供充足受體。

代謝特性：葡萄糖消耗速率為 25 mg/10? cells / 天，乳酸積累量較貼壁細胞降低 25%，更適合高密度長時間培養(yǎng)。

滅活疫苗規(guī)模化生產(chǎn)：在 1000L 攪拌式生物反應(yīng)器中，Vero E6-S 細胞密度達 3×10? cells/mL，SARS-CoV-2 病毒滴度穩(wěn)定在 10?.? TCID??/mL，單批次病毒產(chǎn)量達 3×1011 TCID??，可生產(chǎn) 3000 萬劑滅活疫苗，較轉(zhuǎn)瓶工藝效率提升 15 倍，生產(chǎn)成本降低 50%。疫苗中宿主細胞蛋白殘留量＜30ng / 劑，符合 WHO 標準。

病毒樣顆粒（VLP）表達：作為重組桿狀病毒的宿主細胞，可高效表達冠狀病毒 S 蛋白 VLP，產(chǎn)量達 5μg/10? cells，純度超 90%，免疫小鼠后中和抗體效價達 1:1280，為亞單位疫苗研發(fā)提供低成本生產(chǎn)平臺。

病毒復(fù)制動力學(xué)研究：利用懸浮培養(yǎng)的均一性，精準測定 SARS-CoV-2 復(fù)制參數(shù)：潛伏期 8-10 小時，對數(shù)期 12-24 小時，平臺期 24-48 小時，為優(yōu)化疫苗生產(chǎn)工藝提供數(shù)據(jù)支撐。

高通量藥物篩選：在 96 孔懸浮培養(yǎng)板中，可同時檢測 200 種以上化合物的抗病毒活性，篩選效率較貼壁培養(yǎng)提升 4 倍。例如，通過該模型篩選出的 3CL 蛋白酶抑制劑，對 SARS-CoV-2 的 EC??=1.2μM，與動物實驗結(jié)果一致性達 0.90。

抗原制備：大量培養(yǎng)的病毒可用于制備冠狀病毒診斷抗原，如 S 蛋白與 N 蛋白，ELISA 試劑盒敏感性達 98%，特異性＞99%，較傳統(tǒng)貼壁培養(yǎng)抗原批間差異降低 60%。

中和抗體檢測：作為病毒中和實驗的標準細胞，其懸浮培養(yǎng)的均一性使檢測變異系數(shù)＜5%，結(jié)果穩(wěn)定性顯著優(yōu)于貼壁細胞，已被納入多個國家的新guan疫苗臨床評價標準。

培養(yǎng)基：無血清 SFM 培養(yǎng)基添加 4mM 谷an酰胺、0.1% Pluronic F-68，pH 維持在 7.2-7.4，每日監(jiān)測溶氧（維持 30%-50%）與葡萄糖濃度（＞1.5g/L）。

傳代流程：取對數(shù)期細胞懸液，1200rpm 離心 5 分鐘，棄上清后用新鮮培養(yǎng)基重懸，按初始密度 8×10? cells/mL 接種至搖瓶（轉(zhuǎn)速 110rpm），避免細胞團過大（＞200μm）導(dǎo)致營養(yǎng)不均。

凍存保護：取密度 2×10? cells/mL 的細胞，加入含 10% DMSO 的凍存液（SFM 培養(yǎng)基配制），程序降溫后液氮保存，復(fù)蘇時 37℃水浴解凍，直接接種至預(yù)熱培養(yǎng)基（無需離心洗滌）。

冠狀病毒接種：細胞密度達 2×10? cells/mL 時，按 MOI=0.05 加入病毒液，37℃培養(yǎng)，感染后 24 小時補加 50% 體積新鮮培養(yǎng)基，48-72 小時收獲病毒液，通過 0.45μm 濾膜澄清。

生物反應(yīng)器控制：采用 pH-stat 補料策略，當(dāng) pH＞7.3 時補加葡萄糖溶液（500g/L），維持代謝穩(wěn)定，可延長病毒復(fù)制期 12 小時，滴度提升 20%。

優(yōu)勢：

局限性：