HBR-S2銀星竹鼠皮膚細胞系
HBR-S2銀星竹鼠皮膚細胞系在銀星竹鼠皮膚生物學研究領域具有不可替代的重要意義,為深入探究銀星竹鼠皮膚細胞的特性與功能提供了穩定可靠的體外研究工具,助力科研人員系統剖析銀星竹鼠皮膚的發育機制、屏障功能及相關病理過程,為該物種的保護與研究奠定了關鍵基礎。
銀星竹鼠作為常年棲息于竹林和洞穴的嚙齒類動物,其皮膚系統進化出了獨te的適應性特征。在潮濕多菌的竹林環境中,皮膚需高效抵御竹類腐生微生物的侵襲;在洞穴活動時,又要耐受頻繁的摩擦損傷,同時維持體溫與水分平衡。皮膚細胞作為這些功能的核心執行者,其生理特性與銀星竹鼠的生存策略緊密相連。以往對銀星竹鼠皮膚的研究多局限于整體動物觀察,難以在細胞層面解析屏障功能的分子調控網絡,而原代皮膚細胞培養存在存活期短、傳代后功能衰減等問題,嚴重制約了研究深度。HBR-S2 細胞系的建立,恰好填bu了這一研究空白。
HBR-S2 銀星竹鼠皮膚細胞系源自健康成年銀星竹鼠的背部真皮組織,通過原代培養與特異性純化技術構建而成。建立過程嚴格遵循無菌操作規范:在超凈工作臺內獲取皮膚組織后,精細剝離皮下脂肪與血管網,選取富含成纖維細胞的真皮層,將組織切割為 1mm3 的勻質小塊;用含青mei素 - 鏈mei素雙抗的磷酸鹽緩沖液反復沖洗 5-6 次,徹di去除殘留血液與雜質;加入含膠原酶的專用分散液,在 37℃恒溫水浴中消化 35 分鐘,期間每 10 分鐘輕柔吹打以確保細胞充分分離;經 70μm 濾網過濾去除組織碎屑后,1000r/min 離心 8 分鐘收集細胞,用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養液重懸,接種于預包被明膠的培養瓶中,置于 37℃、5% CO?培養箱中培養。初期每日更換培養液以淘汰非貼壁細胞,待細胞匯合度達 80% 時采用 0.25% yi酶消化傳代。目前該細胞系已穩定傳代 45 代,經臺盼藍染色檢測,細胞活力持續保持在 88% 以上。
該細胞系呈現典型的成纖維樣形態特征:細胞呈長梭形,胞體兩端稍尖,平均長度約 50μm,寬度 12μm,排列呈放射狀或多層網狀;胞質豐富,可見密集的膠原纖維束,經免疫熒光染色顯示呈強陽性;細胞核呈橢圓形,位于細胞中央,核質比約 1:3,具有穩定的貼壁生長特性。生長動力學研究表明,HBR-S2 細胞在 DMEM/F12 培養液中表現最佳,較 MEM 培養液增殖速率提升 21%;最適培養溫度為 37℃,偏離 1℃即導致增殖率下降 12%;10% 胎牛血清濃度下群體倍增時間最短,為 67 小時,血清濃度降至 5% 時倍增時間延長至 92 小時。連續傳代 30 代后,細胞形態無明顯變異,核型分析顯示染色體數目穩定為 2n=64,與銀星竹鼠體細胞一致,證實其遺傳背景穩定。
功能特性研究顯示,HBR-S2 細胞高表達成纖維細胞特異性標志物:波形蛋白(Vimentin)陽性率 98%,Ⅰ 型膠原蛋白(ColⅠ)分泌量達 35μg/10?cells/24h,FSP-1 蛋白表達強度顯著高于上皮細胞系。該細胞具有ji強的基質合成能力,除 ColⅠ 外,還可分泌 ColⅢ、纖連蛋白等 extracellular 基質成分,在三維培養體系中能形成類似真皮的纖維網絡結構。環境適應實驗表明,當暴露于 95% 濕度環境時,細胞 AQP3 基因表達量在 24 小時內上調 3.2 倍,抗菌肽 β- 防御素 2 分泌量增加 2.8 倍,體現出對潮濕環境的快速響應機制。模擬竹纖維摩擦刺激后,基質金屬蛋白酶 MMP-2 活性升高 40%,TIMP-1 表達上調,提示存在活躍的細胞外基質重塑過程。
在應用價值方面,HBR-S2 細胞系已成為多個研究領域的關鍵工具:在發育生物學中,通過 CRISPR-Cas9 技術敲除 TGF-β1 基因后,細胞膠原合成量下降 62%,證實該基因在皮膚纖維化中的調控作用;比較生理學研究發現,與社鼠皮膚細胞相比,HBR-S2 細胞的 AQP3 基礎表達量高 2.1 倍,揭示其潮濕環境適應的分子基礎;在獸醫學領域,該細胞系已用于篩選竹鼠皮膚真菌病治療藥物,發現特比萘芬在 2μg/mL 濃度時可抑制 90% 的菌絲入侵,且對細胞毒性低于氟kang唑。
作為首ge永生化銀星竹鼠皮膚細胞系,HBR-S2 不僅為該物種的皮膚生物學研究提供了標準化模型,其獨te的環境適應機制研究還可為嚙齒類動物比較生理學提供新視角,在野生動物保護、皮膚疾病模型構建等領域具有重要的科研與應用價值。
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