HBR-M1銀星竹鼠肌肉細胞系
HBR-M1銀星竹鼠肌肉細胞系在銀星竹鼠肌肉生物學研究領(lǐng)域具有重要意義，為深入探究銀星竹鼠肌肉細胞的特性與功能提供了可靠的體外研究工具，助力科研人員剖析銀星竹鼠肌肉的發(fā)育機制、收縮規(guī)律及相關(guān)病理過程。
銀星竹鼠作為以竹類為主要食物的嚙齒類動物，其肌肉系統(tǒng)在適應(yīng)洞穴棲息、攀爬竹子及咀嚼堅硬竹纖維等行為中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。肌肉細胞是肌肉組織實現(xiàn)這些功能的基本單位，其生理特性與銀星竹鼠的生存適應(yīng)和攝食能力密切相關(guān)。以往對銀星竹鼠肌肉的研究多依賴整體動物實驗，難以在細胞層面精準解析肌肉的收縮機制和疾病發(fā)生規(guī)律。原代肌肉細胞培養(yǎng)存在存活周期短、功能穩(wěn)定性差、傳代受限等問題，制約了相關(guān)研究的深入開展。因此，HBR-M1 銀星竹鼠肌肉細胞系的建立，為突破這些研究瓶頸提供了新的解決方案。
HBR-M1 銀星竹鼠肌肉細胞系來源于銀星竹鼠的四肢骨骼肌組織，通過原代培養(yǎng)結(jié)合純化技術(shù)建立而成。建立過程嚴格遵循細胞培養(yǎng)規(guī)范，在無菌條件下獲取健康成年銀星竹鼠的四肢肌肉組織，仔細剝離肌膜、結(jié)締組織和血管，選取肌纖維豐富的部分，將組織切割成約 1mm3 的小塊。隨后，用含雙抗的磷酸鹽緩沖液多次沖洗，徹di清除血液和雜質(zhì)。接著，加入專用肌肉細胞分散液，在 37℃環(huán)境中處理 35-45 分鐘，期間每隔 10 分鐘輕柔吹打，促使細胞充分分散。收集細胞懸液后，經(jīng) 70μm 細胞濾網(wǎng)過濾，再以 1000r/min 的轉(zhuǎn)速離心 8 分鐘，棄去上清液，用含有 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)液重懸細胞，接種于培養(yǎng)瓶中，放置在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進行原代培養(yǎng)。培養(yǎng)初期，每 24 小時更換培養(yǎng)液以去除非貼壁細胞，當細胞匯合度達到 80% 左右時進行傳代操作。目前，該細胞系已穩(wěn)定傳代至 40 代以上，細胞活力始終保持在 85% 以上。
該細胞系呈現(xiàn)典型的成纖維樣形態(tài)，細胞呈長梭形，胞體粗壯，排列呈平行狀或交織狀，胞質(zhì)豐富且含有密集的肌絲結(jié)構(gòu)，細胞核呈橢圓形，位于細胞中央，具有較強的貼壁生長特性。在生長特性方面，研究發(fā)現(xiàn) HBR-M1 細胞在 DMEM 培養(yǎng)液中生長狀態(tài)最佳，相較于其他培養(yǎng)液，細胞增殖速度提高約 23%。最適宜的培養(yǎng)溫度為 37℃，與多數(shù)哺乳動物體溫一致；當胎牛血清濃度為 10% 時，細胞群體倍增時間最短，約為 70 小時。歷經(jīng) 30 代傳代后，細胞形態(tài)和增殖速率未出現(xiàn)明顯變化，核型分析顯示其染色體數(shù)目穩(wěn)定，維持銀星竹鼠正常的染色體數(shù)目，遺傳背景可靠，穩(wěn)定保留了肌肉細胞的固有特性。
在功能特性方面，免疫熒光檢測清晰顯示，HBR-M1 細胞高表達肌肉細胞特異性標志物，如肌動蛋白、肌球蛋白和 MyoG，確鑿證實了其肌肉細胞屬性。該細胞系具備較強的收縮能力，在特定刺激下可出現(xiàn)高強度節(jié)律性收縮，模擬肌肉的收縮功能，尤其在模擬咀嚼肌收縮機制中發(fā)揮著重要作用。當 HBR-M1 細胞受到與咀嚼相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)刺激時，細胞收縮相關(guān)基因如 MYH2 的表達量顯著上調(diào)，同時肌肉特異性蛋白的合成增加，展現(xiàn)出良好的響應(yīng)能力，為研究銀星竹鼠肌肉細胞的生長與分化調(diào)控機制提供了關(guān)鍵線索。此外，該細胞系對高纖維飲食相關(guān)的代謝信號表現(xiàn)出敏感性，在特定代謝物刺激下，能量代謝相關(guān)基因的表達量發(fā)生明顯變化，為探究銀星竹鼠肌肉在特殊飲食下的適應(yīng)機制提供了良好的實驗材料。
HBR-M1 銀星竹鼠肌肉細胞系在多個研究領(lǐng)域展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用價值。在肌肉發(fā)育研究中，通過對該細胞系進行基因編輯實驗，成功揭示了 MyoD 基因在銀星竹鼠肌肉細胞分化過程中的關(guān)鍵調(diào)控作用。在比較生理學研究方面，借助該細胞系與其他嚙齒類動物肌肉細胞系的對比分析，清晰闡明了不同物種肌肉功能尤其是咀嚼肌功能的差異及其分子機制。在獸醫(yī)學研究領(lǐng)域，基于該細胞系建立的藥物篩選模型，已用于評估多種影響肌肉功能藥物的安全性和有效性，為銀星竹鼠肌肉病癥的防治研究提供了有力支持。
作為穩(wěn)定可靠的銀星竹鼠肌肉細胞模型，HBR-M1 不僅為銀星竹鼠肌肉生物學研究提供了重要的技術(shù)支撐，推動了相關(guān)學術(shù)研究的深入發(fā)展，還有助于提升對銀星竹鼠這種特色物種的研究水平，為嚙齒類動物肌肉生理及相關(guān)疾病的研究和治療提供了有價值的參考，在基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究領(lǐng)域均具有重要意義。
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