腸屏障標志物與屏障功能：高表達腸黏膜屏障特異性標志物，如閉鎖小帶蛋白 1（ZO-1，陽性率 98%）、黏蛋白 2（MUC2，陽性率 96%），其 ZO-1 在細胞間的線性表達率達 95%（PAM-T1R4-1 無此結構）；跨上皮電阻（TEER）值達 650Ω?cm2（顯著高于 PAM-T1R4-1 的 150Ω?cm2），對 FITC - 葡聚糖的通透性僅為 PAM-T1R4-1 的 1/20，模擬回腸黏膜的物理屏障功能，與豬回腸組織的屏障特性一致性達 93%。

吸收與代謝功能：表達高水平的營養轉運蛋白，如葡萄糖轉運體 SGLT1（陽性率 97%）、氨基酸轉運體 B?AT1（陽性率 95%），葡萄糖吸收效率達 80%（PAM-T1R4-1 幾乎無吸收功能）；能分泌腸肽激素如胰高血糖素樣肽 - 2（GLP-2），含量達 25pg/10?細胞 / 天，可促進自身增殖（細胞活力提升 30%），模擬回腸的營養感知與修復調控功能。

腸道免疫活性：表達 toll 樣受體 4（TLR4，陽性率 90%），經脂多糖（LPS）刺激后，分泌白細胞介素 - 8（IL-8）達 600pg/10?細胞 / 24h（是 PAM-T1R4-1 的 1.5 倍），同時釋放防御素 β2（DEFB2）達 40ng/10?細胞 / 24h，對腸道致病菌的抑菌率達 75%，天然免疫應答模式與豬回腸黏膜高度吻合。

屏障損傷與修復模型：通過該細胞系發現大腸桿菌黏附素可使 ZO-1 表達下降 45%，TEER 值降低 50%，而 GLP-2 處理可逆轉這一損傷（ZO-1 恢復 70%），與仔豬腹瀉模型的腸屏障修復規律一致性達 92%（PAM-T1R4-1 模型無法模擬），揭示 “致病菌 - 屏障破壞 - GLP-2 修復" 的調控軸。

營養物質對屏障的調控：在低纖維培養條件下，細胞 MUC2 分泌下降 35%，屏障通透性增加 40%，補充膳食纖維發酵產物丁酸后，MUC2 恢復至正常水平的 85%，證實短鏈脂肪酸對腸屏障的保護作用，其分子機制研究為飼料配方優化提供依據。

沙門氏菌入侵機制：利用其回腸上皮特性，發現沙門氏菌可通過 Ⅲ 型分泌系統分泌效應蛋白 SipA，促進細胞骨架重排（F - 肌動蛋白聚集增加 2 倍），入侵效率達 35%（PAM-T1R4-1 的入侵率僅 8%），與仔豬沙門氏菌病的回腸定植規律正相關（R2=0.91），研究結果較巨噬細胞模型更接近腸道感染特征。

耐藥菌生物膜形成：在耐頭孢噻呋大腸桿菌感染中，IPI-FX 細胞表面可觀察到生物膜形成（覆蓋率達 60%），而 PAM-T1R4-1 表面僅為 15%，通過轉錄組分析發現細胞外基質蛋白 FN1 表達上調是生物膜定植的關鍵，為抗生物膜藥物研發提供靶點。

腸黏膜修復劑篩選：建立基于 TEER 值恢復率的高通量篩選模型，某植物提取物可使 LPS 損傷的 IPI-FX 細胞屏障功能恢復 70%，MUC2 分泌增加 40%，仔豬腹瀉實驗顯示回腸絨毛高度增加 25%，證實模型的應用價值。

益生菌協同效應評價：在羅伊氏乳桿菌與細胞共培養實驗中，可使大腸桿菌的黏附率下降 60%，IL-8 分泌減少 55%，且該過程依賴細胞 TLR2 的激活（敲除后保護作用消失），與 PAM-T1R4-1 的免疫激活機制形成腸道 - 肺部的差異對比。

培養基：DMEM/F12 培養基添加 10% 胎牛血清、20ng/mL 表皮生長因子（EGF），pH 維持在 7.2-7.4；為誘導分化，可添加 1μM 視huang酸，培養 14 天后微絨毛長度增加 2 倍（PAM-T1R4-1 無需此步驟）。

傳代流程：當細胞融合度達 80% 時，使用 0.25% yi酶 + EDTA 消化（避免過度消化破壞緊密連接），按 1:3 比例接種（與 PAM-T1R4-1 相同），24 小時貼壁率超 90%，需定期檢測 ZO-1 表達確認屏障功能。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養基，細胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達 85%，通過 TEER 值測定驗證功能穩定性（應≥500Ω?cm2）。

屏障功能檢測：細胞接種 Transwell 小室（孔徑 0.4μm），培養 10 天后檢測 TEER 值（應≥600Ω?cm2），加入致病菌后 24 小時測定通透性變化，結果變異系數＜7%；PAM-T1R4-1 對照組用于對比免疫應答差異。

細菌黏附實驗：將 CFSE 標記的大腸桿菌（MOI=100）與細胞共孵育 2 小時，流式細胞術檢測黏附率（正常應＜10%），適合抗感染藥物篩選。

優勢：

局限性：