Wistar大鼠骨髓MSC細胞系
Wistar大鼠骨髓MSC細胞系作為源自 Wistar 大鼠骨髓基質的成體干細胞模型,因具備多向分化潛能、免疫調節功能及組織修復能力,在干細胞生物學、再生醫學及疾病治療研究中具有不可替代的價值,成為探究間充質干細胞特性及應用的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自 Wistar 大鼠骨髓腔的基質細胞,經密度梯度離心法分離和貼壁篩選獲得。細胞形態呈典型的成纖維細胞樣,多為長梭形或紡錘形,胞體大小均勻(長度約 50-80μm,寬度約 15-20μm),胞質呈弱嗜堿性,可見豐富的粗面內質網和高爾基體,約 10% 細胞可見分支狀突起,細胞核呈長橢圓形,位于細胞中央,核仁小而清晰。生長方式為貼壁生長,呈漩渦狀或放射狀排列,接觸抑制較弱,傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數符合間充質干細胞特征:倍增時間約 36 小時,連續傳代 25 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,CD29 陽性率達 98%,CD90 陽性率 96%,CD44 陽性率 95%,而造血細胞標志物 CD34 陽性率低于 2%,CD45 陽性率低于 1%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;多向分化潛能顯著,在成骨誘導培養基中培養 14 天后,堿性磷酸酶活性提升 8 倍,鈣結節形成率達 85%;在成脂誘導條件下,脂滴形成率達 75%,脂肪特異性蛋白 PPARγ 表達量增加 6 倍;在成軟骨誘導環境中,Ⅱ 型膠原蛋白分泌量達 45ng/mL;免疫調節功能突出,可分泌 IL-10、TGF-β 等抑炎因子,基礎 IL-10 分泌量達 28pg/mL;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在再生醫學研究中,Wistar 大鼠骨髓 MSC 與骨缺損模型結合時,可促進新骨形成,術后 4 周骨缺損修復率達 65%,骨密度較對照組增加 40%,成骨相關基因 Runx2 表達量提升 5.2 倍,可模擬干細胞在骨組織再生中的作用,為骨缺損修復研究提供理想模型。
免疫調節機制研究方面,該細胞與 T 淋巴細胞共培養時,可抑制 T 細胞增殖活性達 55%,調節性 T 細胞比例增加 30%,炎癥因子 IFN-γ 分泌量下降 45%,可模擬間充質干細胞對免疫應答的調控過程,適用于探究自身免疫性疾病的發病機制及治療策略。
疾病治療研究領域,該細胞經缺氧預處理后,血管內皮生長因子(VEGF)分泌量增加 4.8 倍,移植到心肌缺血模型后,可促進血管新生,缺血區域血流量提升 50%,心肌細胞凋亡率下降 35%,能很好地模擬干細胞在缺血性疾病中的治療效應,為探究干細胞移植治療心血管疾病的機制提供實驗基礎。此外,該細胞與軟骨細胞共培養時,可促進軟骨細胞外基質合成,Ⅱ 型膠原蛋白含量增加 3.2 倍,可用于探究干細胞在軟骨組織工程中的應用潛力。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 α-MEM 培養基,添加 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2 天更換一次,以維持細胞的增殖活性和分化潛能。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入專用細胞解離液,37℃孵育 5-7 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:3-1:5,每 3-4 天傳代一次,避免細胞過度密集導致分化。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 5×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 90% 以上,2-3 代內可恢復正常的生長和分化功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物且排列規則后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁更換血清批次,以防影響細胞的分化潛能。
Wistar 大鼠骨髓 MSC 細胞系以其穩定的干細胞特性、強大的分化潛能及顯著的免疫調節功能,在干細胞生物學研究與再生醫學應用中發揮著重要作用,為揭示干細胞的生物學特性和開發新型細胞治療策略提供了可靠的細胞模型。
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