來源與馴化：該細(xì)胞系源自 CHO-K1 細(xì)胞，通過多輪加壓篩選與傳代馴化獲得：初期以高表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP）為報(bào)告基因，篩選高分泌克隆；后續(xù)通過無血清培養(yǎng)基適應(yīng)性培養(yǎng)，逐步增強(qiáng)懸浮生長能力與蛋白表達(dá)穩(wěn)定性，最終獲得 CHO-X106 株系。“X106" 代表其在馴化過程中第 106 代篩選獲得的優(yōu)勢(shì)克隆，標(biāo)識(shí)其經(jīng)過系統(tǒng)優(yōu)化的特性。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型上皮樣形態(tài)，可適應(yīng)貼壁與懸浮兩種生長模式，懸浮培養(yǎng)時(shí)形成松散小聚集體（直徑 30-50μm），細(xì)胞圓潤飽滿，邊緣清晰，活力長期維持在 92% 以上。在 37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 28-34 小時(shí)，適應(yīng)無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基（如 EX-CELL CHO Medium），高密度培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞密度可達(dá) 1.2×10?個(gè) /mL，傳代 100 次以上仍保持穩(wěn)定生長速率，蛋白表達(dá)量無明顯衰減，凍存復(fù)蘇后存活率超 90%。

表達(dá)特征：該細(xì)胞系的核心優(yōu)勢(shì)在于重組蛋白高表達(dá)能力：轉(zhuǎn)染外源基因后，抗體類蛋白表達(dá)量可達(dá) 6-8g/L（流加培養(yǎng)條件下），較普通 CHO-K1 提升 40%-60%；其分泌的重組蛋白糖基化修飾均一，唾液酸含量、巖藻糖比例等關(guān)鍵質(zhì)量屬性波動(dòng)＜5%（通過 UPLC 檢測(cè)），且熱穩(wěn)定性優(yōu)異（Tm 值比普通株系高 2-3℃），更符合生物藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

優(yōu)勢(shì)：重組蛋白表達(dá)量顯著高于普通 CHO 亞型，工業(yè)化生產(chǎn)效率優(yōu)勢(shì)明顯；兼容貼壁與懸浮培養(yǎng)，可根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模靈活選擇培養(yǎng)模式；無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基適應(yīng)性強(qiáng)，降低血清來源的污染風(fēng)險(xiǎn)；遺傳穩(wěn)定性優(yōu)異，連續(xù)傳代 100 次后蛋白表達(dá)量波動(dòng)＜8%，保證生產(chǎn)批次一致性。

局限性：對(duì)部分含復(fù)雜糖基化修飾的蛋白（如某些細(xì)胞因子），糖型與人源組織存在細(xì)微差異，需通過糖基轉(zhuǎn)移酶工程改造優(yōu)化；懸浮培養(yǎng)時(shí)聚集體過大（＞100μm）可能影響傳質(zhì)效率，需添加抗結(jié)塊劑調(diào)控；初始細(xì)胞系構(gòu)建周期較長（約 3-4 個(gè)月），不適合快速篩選需求。

培養(yǎng)條件：懸浮培養(yǎng)推薦使用無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基，添加 4mM 谷an酰胺與 1× 消泡劑，37℃、5% CO?環(huán)境中攪拌培養(yǎng)（轉(zhuǎn)速 110-130 rpm）。傳代時(shí)維持細(xì)胞密度在 3×10?-8×10?個(gè) /mL，避免密度過低導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。流加培養(yǎng)階段，可補(bǔ)加葡萄糖（維持濃度 3-5g/L）與氨基酸混合物，延長細(xì)胞對(duì)數(shù)生長期。

質(zhì)控與安全：定期通過 STR 鑒定確認(rèn)細(xì)胞身份，排除交叉污染；采用 ELISA 檢測(cè)目的蛋白表達(dá)量，確保穩(wěn)定性；支原體檢測(cè)需為陰性，內(nèi)毒素水平控制在 0.1EU/mL 以下。凍存使用含 10% DMSO 的無血清凍存液，梯度降溫后保存于液氮，復(fù)蘇后傳代 2-3 次待狀態(tài)穩(wěn)定后用于生產(chǎn)，保證產(chǎn)品質(zhì)量一致性。