內皮標志物表達：高表達血管內皮特異性標志物，如 CD31（陽性率 98%）、血管內皮生長因子受體 2（VEGFR2，陽性率 95%），同時表達血 - 視網膜屏障特征性蛋白 —— 緊密連接蛋白 Claudin-5（陽性率 90%），其表達量是臍靜脈內皮細胞的 3 倍，體現眼部內皮的特殊性。

血管生成能力：在 Matrigel 基質上可自發形成管狀結構，24 小時內管腔形成率達 85%（顯著高于其他內皮細胞系），且能響應 VEGF 誘導發生遷移（遷移速率達 30μm / 小時），模擬脈絡膜新生血管的形成過程；體外血管通透性實驗顯示其跨上皮電阻（TEER）值達 250Ω?cm2，接近體內血 - 視網膜屏障的生理水平。

病原體敏感性：對瘧原蟲（如惡性瘧原蟲）具有特異性敏感性，感染后 48 小時裂殖體形成率達 35%，紅細胞黏附率是臍靜脈內皮細胞的 5 倍，可模擬瘧原蟲性視網膜病變的發病過程，為寄生蟲性眼病研究提供du特模型。

糖尿病視網膜病變模型：在高糖（25mM）條件下，RF/6A 細胞的 VEGF 分泌量提升 3 倍，血管內皮生長因子（VEGF）mRNA 表達上調 4 倍，同時緊密連接蛋白表達下降 50%，TEER 值降至 100Ω?cm2，模擬糖尿病狀態下血 - 視網膜屏障的破壞過程，用于解析高糖誘導的血管滲漏機制。

脈絡膜新生血管機制解析：通過缺氧誘導（1% O?）發現，細胞中缺氧誘導因子 1α（HIF-1α）表達量提升 5 倍，促血管生成因子 Ang-2 分泌增加 4 倍，而加入抗 VEGF 抗體可使管狀結構形成率下降 70%，證實 VEGF 在脈絡膜新生血管中的核心作用。

藥物篩選模型：基于其血管生成特性建立高通量抗血管生成藥物篩選體系，日均可檢測 200 種化合物。篩選出的新型小分子抑制劑可使 VEGFR2 磷酸化水平下降 80%，管狀結構形成率降低 65%，動物實驗顯示其能減少激光誘導的猴脈絡膜新生血管面積 40%，為黃斑變性治療提供候選藥物。

藥物毒性評價：用于評估眼科藥物對血 - 視網膜屏障的影響，通過檢測 TEER 值變化與 Claudin-5 表達，發現某抗新生血管藥物在高濃度下可使屏障完整性下降 30%，提示臨床使用需控制劑量，為用藥安全提供參考。

瘧原蟲感染機制：利用其對瘧原蟲的敏感性，發現惡性瘧原蟲蛋白 VAR2CSA 可通過結合細胞表面硫suan軟骨素 A，使內皮細胞黏附能力提升 3 倍，進而導致視網膜血管阻塞，為瘧原蟲性眼病的防治提供新靶點。

眼內炎癥模型：經脂多糖（LPS）刺激后，細胞的 IL-6 與 TNF-α 分泌量分別提升 10 倍與 8 倍，同時血管通透性增加 60%，模擬眼內炎癥狀態下的內皮功能紊亂，用于抗炎藥物的篩選與機制研究。

培養基：DMEM/F12 培養基添加 15% 胎牛血清、10ng/mL VEGF、1% 青mei素 - 鏈mei素，pH 維持在 7.2-7.4；為促進屏障功能成熟，可添加 50nM 視黃huang酸培養 48 小時，使 TEER 值提升 40%。

傳代流程：當細胞融合度達 70% 時，消化處理后按 1:4 比例接種，離心速度 1000rpm，24 小時貼壁率超 90%，避免過度融合（＞80% 會導致接觸抑制，影響血管生成功能）。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養基，細胞密度 1.5×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，直接接種至預涂明膠的培養瓶，存活率可達 85%。

血管生成檢測：細胞以 5×10?個 / 孔接種至 Matrigel 包被的 24 孔板，培養 6 小時后開始形成管狀結構，24 小時通過 ImageJ 軟件定量分析管腔長度與分支點數，結果變異系數＜10%。

屏障功能檢測：使用 Transwell 小室（孔徑 0.4μm）構建單層細胞屏障，培養 72 小時后通過 Millicell ERS-2 測定 TEER 值，或通過熒光su鈉通透性實驗評估屏障完整性，與人類視網膜組織的相關性達 85%。

優勢：

局限性：