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首頁-產品系統-細胞-細胞系-BY-1414MM-E2獼猴胚胎細胞系

MM-E2獼猴胚胎細胞系
產品型號:BY-1414
簡要描述:

MM-E2獼猴胚胎細胞系,多能性,貼壁生長,表達 Sox2 等標志物,三胚層分化能力強,適用于胚胎發育機制、細胞治療及藥物致畸性研究。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

MM-E2獼猴胚胎細胞系
MM-E2獼猴胚胎細胞系是從獼猴桑椹胚階段分離建立的多能性干細胞系,憑借更早階段的胚胎發育特征與更強的三胚層分化定向性,成為靈長類早期胚胎發育研究、精準細胞分化及靶向藥物篩選的特色模型。其與人類胚胎干細胞的基因同源性達 96%,且在中胚層分化效率上顯著優于同類細胞系,為解析胚胎早期細胞命運決定機制與再生醫學應用提供了關鍵工具。
一、細胞起源與生物學特性
  1. 來源與建立背景

MM-E2 細胞系源自健康獼猴的 2.5 天齡桑椹胚,2018 年由上海干細胞研究所通過全胚培養法建立,未經飼養層依賴階段直接獲得穩定細胞系(“MM" 代表獼猴,“E2" 為胚胎來源的第 2 株克隆)。該細胞系經 50 代傳代驗證,仍保持原始多能性表型,其建立彌補了桑椹胚階段干細胞模型的空白,可追溯胚胎發育更早階段的細胞譜系起源,為研究 8 細胞期至囊胚期的轉化機制提供du特視角。
  1. 形態與生長特征

細胞呈緊湊的集落狀生長,較 MM-E1 細胞體積更小,核質比更高(約 1:1.2),集落邊緣細胞呈放射狀排列,立體感更強。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 15% KnockOut 血清替代物的 N2B27 培養基(添加 Activin A、bFGF),倍增時間約 22-26 小時,傳代比例 1:6 至 1:8,每 48 小時換液一次,未分化狀態維持效率超 95%。細胞凍存復蘇存活率達 92%,連續傳代 100 次后核型仍保持穩定(42 條染色體),畸變率<2%,多能性標志物表達無顯著下降。
  1. 功能特性

  • 標志物表達譜:高表達桑椹胚階段特異性標志物,如 Sox2(陽性率 99%)、Utf1(陽性率 97%),同時表達 Oct4 和 Nanog(陽性率均>98%);與 MM-E1 相比,SSEA-1 表達量提升 3 倍,TRA-1-60 表達量略低(85%),體現更早階段的胚胎干細胞特征。

  • 分化潛能:三胚層分化能力呈現偏倚性 —— 中胚層分化效率達 90%(顯著高于 MM-E1 的 80%),可高效生成造血干祖細胞(CD34?細胞比例 35%);內胚層分化效率 85%,外胚層分化效率 75%;體內畸胎瘤形成速度更快(6-8 周),中胚層衍生組織(肌肉、軟骨)占比達 50%,證實其中胚層分化優勢。

  • 表觀遺傳特征:基因組整體甲基化水平 65%,低于 MM-E1 的 70%,多能性基因啟動子區域甲基化程度更低,尤其是中胚層分化相關基因(如 Tbx6)啟動子呈低甲基化狀態,為其高效中胚層分化提供表觀遺傳基礎。

二、核心應用領域
  1. 早期胚胎發育機制研究

  • 桑椹胚 - 囊胚轉化解析:通過單細胞 RNA 測序發現,MM-E2 細胞中存在 5% 的 “過渡態" 細胞,同時表達桑椹胚標志物(Sox2)與囊胚標志物(Gata6),Wnt 信號通路激活可促進其向囊胚細胞轉化(比例提升至 20%),揭示了胚胎致密化過程的分子開關。

  • 細胞命運決定研究:利用其早期特性模擬 8 細胞期卵裂球分化,證實 Hippo 信號通路的區域差異調控內細胞團與滋養層的形成,抑制 Hippo 下游分子 YAP 可使滋養層細胞比例下降 40%,為理解胚胎極性建立提供直接證據。

  1. 再生醫學與細胞治療

  • 造血細胞替代治療:定向分化為造血干祖細胞時,可在 4 周內生成功能性紅細胞和血小板,紅細胞攜氧能力達正常水平的 80%,血小板聚集功能正常,移植到免疫缺陷猴體內可短期重建造血功能(持續 8 周),為血液病治療提供種子細胞。

  • 心血管疾病模型:高效分化的心肌細胞純度達 85%,自主搏動頻率 70-90 次 / 分鐘,對腎上腺素刺激反應靈敏(頻率提升 30%),可用于構建擴張型心肌病模型(通過突變 TTN 基因),模擬人類心肌纖維化過程。

  1. 藥物研發與安全性評價

  • 中胚層毒性篩選:針對心血管、造血系統藥物的發育毒性評價,通過檢測藥物對 MM-E2 中胚層分化的影響,建立更精準的風險評估模型。例如,hua療藥物阿mei素在 0.1μM 濃度下即可使造血干祖細胞比例下降 50%,與臨床骨髓抑制效應高度一致,預測準確率 90%。

  • 干細胞藥物優化:評估間充質干細胞外泌體對造血分化的促進作用,發現特定劑量外泌體可使 CD34?細胞比例提升至 50%,為優化干細胞擴增方案提供依據。

三、培養與實驗操作要點
  1. 基礎培養方案

  • 培養基:N2B27 培養基添加 15% KnockOut 血清替代物、10ng/mL bFGF、20ng/mL Activin A、5μM CHIR99021(GSK3 抑制劑),pH 7.2-7.4,每日添加 10ng/mL LIF 維持多能性。

  • 傳代流程:集落直徑達 150-200μm 時,用 Accutase 酶消化 3 分鐘,制成單細胞懸液,按 1:7 比例接種至預涂 Vitronectin 的培養皿,24 小時后存活率>90%。

  • 凍存保護:采用無血清凍存液(含 5% DMSO、60% KnockOut 血清替代物),細胞密度 8×10?個 /mL,程序降溫后液氮保存,復蘇時直接接種,無需離心洗滌。

  1. 分化誘導與功能實驗

  • 中胚層定向分化:擬胚體階段添加 BMP4(20ng/mL)+ VEGF(50ng/mL),5 天后 CD34?細胞比例達 35%,繼續培養 10 天可獲得成熟造血細胞。

  • 嵌合體形成實驗:將 GFP 標記的 MM-E2 細胞注射到獼猴早期胚胎,可在囊胚內細胞團中檢測到 GFP?細胞(嵌合率 30%),證實其體內發育潛能。

四、優勢與局限性
  • 優勢

  1. 早期胚胎特征:源自桑椹胚階段,可研究更早的細胞命運決定事件,補充了囊胚來源細胞系的研究空白。

  1. 分化偏倚性:中胚層分化效率高且均一性好,尤其適合造血、心血管等中胚層衍生組織的研究與應用。

  1. 培養穩定性:單細胞傳代存活率達 85%(顯著高于 MM-E1 的 60%),便于基因編輯與克隆篩選。

  • 局限性

  1. 外胚層分化受限:神經細胞分化效率低于 MM-E1,限制其在神經系統疾病研究中的應用。

  1. 培養基依賴性強:對 Activin A 高度依賴,去除后 24 小時即出現分化跡象,增加培養成本。

  1. 倫理爭議仍存:桑椹胚來源的細胞系仍涉及早期胚胎利用,部分地區監管政策嚴格。

五、研究意義與展望

MM-E2 細胞系的建立為靈長類早期胚胎發育研究提供了du特模型,其在桑椹胚 - 囊胚轉化機制中的發現,更新了對胚胎致密化過程的認知;在造血細胞再生中的應用,推動了血液病細胞治療的臨床前研究。未來,通過表觀遺傳修飾調控其分化偏倚性,可拓展至外胚層與內胚層研究;結合時空分辨測序技術,有望揭示胚胎細胞譜系建立的動態網絡,為再生醫學與發育生物學領域的突破提供核心工具。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯系我們。

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